[發明專利]miR-378生物標志物在胃癌檢測、診斷中的應用

無效

• 申請號: 201110022691.1
• 申請日: 2011-01-20
• 公開（公告）號: CN102605042A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發明（設計）人: 劉寒梢;孟憲欣;張偉;張春秀;肖華勝
• 申請（專利權）人: 上海生物芯片有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 上海浦一知識產權代理有限公司 31211
• 代理人: 高月紅

1.一種用于胃癌檢測的miRNA生物標志物，其特征在于：所述miRNA生物標志物是如SEQ?ID?NO.1所示miRNA序列的miR-378。

2.如權利要求1所述的用于胃癌檢測的miRNA生物標志物，其特征在于：所述miR-378在胃癌患者血清中的特異性表達上調。

3.如權利要求1或2所述的miR-378生物標志物還應用于胃癌的診斷。

4.如權利要求1所述的應用于miR-378生物標志物的實時定量PCR反應中的內參，其特征在于：所述內參為U6snRNA，其引物序列如SEQ?ID?NO.2所示。

5.如權利要求1所述的利用miR-378生物標志物進行胃癌檢測的方法，包括步驟：

(1)收集人血清樣本；

(2)提取血清中總RNA；

(3)對miR-378生物標志物進行反轉錄和實時定量PCR反應，并計算miR-378生物標志物的PCR相對定量值；

(4)當樣本中的miR-378生物標志物的PCR相對定量值小于或等于2.9時，則認為是非胃癌樣本；大于2.9時，則認為是胃癌樣本。

6.如權利要求5所述的利用miR-378生物標志物進行胃癌檢測的方法，其特征在于：所述步驟(1)收集人血清樣本的具體操作為：將收集的人血樣本放入不含EDTA的試管中，靜置凝固后，取上清在4℃下600g～900g離心5～15分鐘后，再取上清，并在4℃下12000g～16000g離心5～15分鐘，取上清即得。

7.如權利要求5所述的利用miR-378生物標志物進行胃癌檢測的方法，其特征在于：所述步驟(3)中的實時定量PCR反應中，以U6snRNA作為內參，該內參的引物序列如SEQ?ID?NO.2所示，miR-378生物標志物的引物序列如SEQ?ID?NO.3所示；并使用2^ΔCt公式來計算miR-378生物標志物的PCR相對定量值，式中ΔCt＝Ct_{生物標志物}-Ct_U6。

8.如權利要求1所述的用于胃癌檢測的miR-378生物標志物檢測試劑盒，其特征在于：所述檢測試劑盒包括：常規實時定量PCR試劑、如SEQ?ID?NO.2所示的內參U6snRNA的檢測引物、如SEQ?ID?NO.3所示的miR-378生物標志物的檢測引物。

9.如權利要求8所述的用于胃癌檢測的miR-378生物標志物檢測試劑盒，其特征在于：所述常規實時定量PCR試劑包括：Taq酶、dNTP試劑、熒光試劑、PCR緩沖液、DEPC處理水。