[發明專利]一種MicroRNA特異表達譜及其應用無效
| 申請號： | 201110021905.3 | 申請日： | 2011-01-18 |
| 公開（公告）號： | CN102586412A | 公開（公告）日： | 2012-07-18 |
| 發明（設計）人： | 彭志海;韓中博;樊軍衛 | 申請（專利權）人： | 上海市第一人民醫院 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 吳桂琴 |
| 地址： | 20008*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 microrna 特異 表達 及其 應用 | ||
1.一種MicroRNA特異表達譜，其特征在于，所述的MicroRNA特異表達譜為hsa-mir-19a、hsa-mir-24、hsa-mir-223、has-mir-126和has-mir-886-5p。
2.按權利要求1所述的MicroRNA特異表達譜，其特征在于，所述的MicroRNA特異表達譜通過以下步驟獲得：
(1)標本準備
肝癌肝移植術后離體肝臟腫瘤石蠟包埋標本；
RNA抽提試劑trizol抽提RNA，-80℃備用；
(2)microRNA?microarray分析差異表達的miRNAs
采用microRNA?microarray芯片分析肝癌肝移植術后腫瘤復發離體標本和腫瘤未復發離體標本間差異表達的miRNAs；
采用Array?Power標記試劑盒，用標記酶將Hy3TM或Hy5TM熒光基團標記miRNA，得到用于與芯片雜交的熒光探針；
在標準條件下使用雜交儀將標記好的探針與上述芯片雜交；
使用芯片掃描儀掃描芯片的熒光強度，將實驗結果轉換成數字型數據保存，使用配套軟件對原始數據進行分析運算；
(3)Taqman?real-time?PCR驗證芯片結果并擴大樣本量，進一步驗證差異表達miRNAs。
3.按權利要求2所述的MicroRNA特異表達譜，其特征在于，步驟(2)所述的芯片分析肝癌肝移植術后腫瘤復發離體標本和腫瘤未復發離體標本間差異表達的miRNAs中，調節設立主要參數為：檢測分子量范圍0-50,000道爾頓，激光強度200，檢測敏感度9，檢測點20-80。
4.權利要求1所述的MicroRNA特異表達譜在制備肝癌肝移植術后腫瘤復發早期診斷標準中的用途。
5.權利要求1所述的MicroRNA特異表達譜在制備肝癌肝移植術后腫瘤復發預后判斷標準中的用途。
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