[發明專利]高抗草甘膦特變基因及其改良方法和應用

有效

• 申請號: 201110009329.0
• 申請日: 2011-01-17
• 公開（公告）號: CN102146371A
• 公開（公告）日: 2011-08-10
• 發明（設計）人: 沈志成;林朝陽;徐曉麗;李新蘭
• 申請（專利權）人: 杭州瑞豐生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10;C12N15/29;C12N15/63;C07K14/415;A01H5/00
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

1.一種通過人工特變獲得高抗草甘膦G1174基因特變體的方法，其特征是：在基因G1174編碼的蛋白質的第95到114位的氨基酸序列中引入2個或者2個以上的氨基酸特變，然后選擇高抗草甘膦的突變體。

2.?根據權利要求1所述的通過人工特變獲得高抗草甘膦G1174基因特變體的方法，其特征是：1）、?這種抗草甘膦基因編碼的蛋白質的氨基酸序列與G1174具有至少75%的相同性；?2）、在對應于基因G1174編碼的蛋白質的95到114位的氨基酸序列中引入2個或者2個以上的氨基酸特變，然后選擇高抗草甘膦的突變體。

3.?根據權利要求2所述的通過人工特變獲得高抗草甘膦G1174基因特變體的方法，其特征是在以下任意2個或2個以上的位點同時特變：1）、第91號甘氨酸；2）、第92號丙氨酸；3）、第96號苯丙氨酸；4）、第98號甲硫氨酸；5）、第99號甘氨酸。

4.?根據權利要求3所述的通過人工特變獲得高抗草甘膦G1174基因特變體的方法，其特征是同時發生以下任意2個或2個以上的位點的特變：

1）、第91號氨基酸從甘氨酸特變成為丙氨酸；

2）、第92號氨基酸從丙氨酸特變成為苯丙氨酸或者蘇氨酸或者甲硫氨酸或者絲氨酸；

3）、第96號氨基酸從苯丙氨酸特變成為亮氨酸或者絲氨酸；

4）、第98號氨基酸從甲硫氨酸特變成為亮氨酸或者絲氨酸；

5）、第99號氨基酸從甘氨酸特變成為丙氨酸。

5.?利用權利要求1~4所述方法獲得的高抗草甘膦特變基因編碼的蛋白質，其特征是：所述蛋白質的第95到114位的氨基酸序列為SEQ?ID?NO：4~SEQ?ID?NO：24中的任意一種。

6.一種高抗草甘膦特變基因，其特征是所述基因的核苷酸序列為SEQ?ID?NO：26~?SEQ?ID?NO：30中的任意一種。

7.?一種載體，其特征是：包含權利要求6所述的高抗草甘膦特變基因。

8.?如權利要求6所述高抗草甘膦特變基因的用途，其特征是：通過轉基因在植物中表達，從而使植物獲得抗草甘膦能力。

9.?根據權利要求8所述的高抗草甘膦特變基因的用途，其特征是：所述植物為水稻、玉米、棉花、小麥、大麥、高粱、油菜、大豆、草坪草或牧草。