[發(fā)明專(zhuān)利]快速分析乳粉中三聚氰胺含量的激光拉曼光譜檢測(cè)方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110008009.3
• 申請(qǐng)日: 2011-01-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102087217A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-06-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李揮;張敬軒;張巖;張會(huì)軍;李強(qiáng);李國(guó)俊;劉春偉
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 河北省食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院
• 主分類(lèi)號(hào): G01N21/65
• 分類(lèi)號(hào): G01N21/65
• 代理公司: 石家莊國(guó)為知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所 13120
• 代理人: 李榮文

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種檢測(cè)方法，尤其是一種快速分析乳粉中三聚氰胺含量的激光拉曼光譜檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

2008年的三聚氰胺奶粉事件對(duì)食品安全再次敲響了警鐘。在原料奶中摻兌三聚氰胺可以提高原料奶的氮含量，我國(guó)現(xiàn)行的奶制品蛋白含量測(cè)定中，依然用凱氏定氮法，通過(guò)奶制品中的氮含量來(lái)確定蛋白含量。這給不法分子以可乘之機(jī)，通過(guò)添加含氮的廉價(jià)工業(yè)原料來(lái)提高原料奶的氮含量，使檢測(cè)結(jié)果表現(xiàn)出蛋白質(zhì)含量虛高的假象。長(zhǎng)期攝入三聚氰胺會(huì)造成生殖、泌尿系統(tǒng)的損害，導(dǎo)致膀胱、腎部結(jié)石等。

盡管日前國(guó)家批準(zhǔn)發(fā)布了《原料乳中三聚氰胺快速檢測(cè)?液相色譜法》國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，但所需的液相色譜儀現(xiàn)場(chǎng)操作條件苛刻（流動(dòng)性是汞），操作復(fù)雜，耗材成本高，分析速度不理想。

為了達(dá)到三聚氰胺檢測(cè)重復(fù)性好、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、實(shí)驗(yàn)成本低、快速檢測(cè)、易于普及推廣的目標(biāo)，國(guó)內(nèi)外做了很多研究。其中，申請(qǐng)?zhí)枮?00810225085.8的中國(guó)專(zhuān)利《用于液態(tài)奶中三聚氰胺現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的拉曼光譜法及試劑盒》，該專(zhuān)利采用拉曼光譜法檢測(cè)三聚氰胺，操作簡(jiǎn)便、靈敏準(zhǔn)確、重現(xiàn)性良好，但是只適用于液態(tài)奶。對(duì)于乳粉，其成分復(fù)雜，利用上述專(zhuān)利的方法進(jìn)行處理，三聚氰胺的回收率低，達(dá)不到檢測(cè)要求；現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)乳粉的前處理步驟繁瑣，且不適于拉曼光譜儀的檢測(cè)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種樣品前處理簡(jiǎn)單的快速分析乳粉中三聚氰胺含量的激光拉曼光譜檢測(cè)方法。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：一種快速分析乳粉中三聚氰胺含量的激光拉曼光譜檢測(cè)方法，按照下述步驟進(jìn)行測(cè)定：

①稱取乳粉1.0～2.0g，加入3～5mL乙腈振蕩、超聲，靜置后，準(zhǔn)確量取上清液，在上清液中加入蛋白沉淀劑，混勻，離心，再準(zhǔn)確取上清液，加入正己烷，振蕩，下清液即為待測(cè)溶液；

②在檢測(cè)池中依次加入表面增強(qiáng)試劑、所述待測(cè)溶液和無(wú)機(jī)鹽絮凝劑，搖勻，置檢測(cè)池于激光拉曼光譜儀檢測(cè)室內(nèi)，在400～1700cm^-1范圍內(nèi)進(jìn)行拉曼光譜掃描獲得拉曼光譜圖；

③進(jìn)行定性判斷：當(dāng)712cm^-1±3cm^-1處存在明顯特征拉曼峰時(shí)，乳粉中存在三聚氰胺；

④定量測(cè)定：對(duì)測(cè)定的拉曼光譜圖，以1017cm^-1±3cm^-1處的特征拉曼峰作為定量基準(zhǔn)峰，采用歸一化方法，根據(jù)三聚氰胺的拉曼光譜信號(hào)的相對(duì)強(qiáng)度與三聚氰胺含量的線性比例關(guān)系，對(duì)乳粉中的三聚氰胺進(jìn)行快速的定量檢測(cè)。

所述蛋白沉淀劑為質(zhì)量濃度為2%的醋酸鉛溶液或者質(zhì)量濃度為2%的醋酸鋅溶液。

所述表面增強(qiáng)劑為金納米溶膠或者銀納米溶膠，所述無(wú)機(jī)鹽凝聚劑為質(zhì)量濃度為1%的氯化鈉溶液或質(zhì)量濃度為1%的氯化鉀溶液。

優(yōu)選的，步驟①取1.00g乳粉，加入3.00mL乙腈振蕩5min，超聲提取5min；靜置1min后，取1mL上清液加入0.050mL蛋白沉淀劑混勻；8000r/min離心1min；取0.50mL上清液，加入0.50mL正己烷，劇烈振蕩1min，下層清液即為待測(cè)液。

所述步驟②待測(cè)溶液的量為0.050mL，表面增強(qiáng)試劑的量為0.50mL，無(wú)機(jī)鹽凝聚劑0.10mL。

本發(fā)明采用乙腈提取三聚氰胺，用蛋白質(zhì)沉淀劑將乳粉中的蛋白質(zhì)沉淀以減少檢測(cè)干擾，最后用正己烷萃取的方法，三聚氰胺的回收率達(dá)到90%以上。

采用上述技術(shù)方案所產(chǎn)生的有益效果在于：本發(fā)明的測(cè)定方法前處理的步驟簡(jiǎn)單、快速，三聚氰胺的回收率高，克服了現(xiàn)有技術(shù)中乳粉的處理方法不適于拉曼光譜檢測(cè)的技術(shù)問(wèn)題；本發(fā)明的可準(zhǔn)確快速地對(duì)三聚氰胺進(jìn)行定性和定量分析，單件乳粉的檢測(cè)從提取到出試驗(yàn)結(jié)果20min；且本發(fā)明實(shí)驗(yàn)耗材成本較低，易于普及推廣，是現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)的重要補(bǔ)充。

附圖說(shuō)明

下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明。

圖1是本發(fā)明實(shí)施例1中某品牌的乳粉的三聚氰胺檢測(cè)的拉曼光譜圖。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

①準(zhǔn)確稱取某品牌乳粉1.00g，加入3.00mL乙腈振蕩提取5min，超聲提取5min；靜置1min后，準(zhǔn)確量取1mL上清液，向上清液中加入質(zhì)量濃度為2%的醋酸鉛0.050mL混勻；以8000r/min轉(zhuǎn)速離心1min；準(zhǔn)確量取0.50mL上清液，加入0.50mL正己烷，劇烈振蕩1min，下層清液即為待測(cè)液；同時(shí)進(jìn)行空白試驗(yàn)和樣品加標(biāo)試驗(yàn)，樣品中加標(biāo)量為2mg/kg。