[發(fā)明專利]一種從提取苦豆子總堿后的剩余藥渣中提取多糖的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110007902.4
• 申請(qǐng)日: 2011-01-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102585022A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-07-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陶遵威;王文彤;鄭奪;邸明磊;單小菊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津市醫(yī)藥科學(xué)研究所
• 主分類號(hào): C08B37/00
• 分類號(hào): C08B37/00;A61P37/02;A61P35/00
• 代理公司: 北京安博達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11271
• 代理人: 徐國(guó)文

1.一種從苦豆子提取苦豆子生物總堿后的藥渣中提取多糖的方法，包括以下步驟：

(1)粉碎：取苦豆子原藥材，粉碎，過(guò)10-60目篩；

(2)醇提：取步驟(1)過(guò)篩后的苦豆子，將其裝入滲漉柱內(nèi)，用濃度為30％-100％的乙醇浸泡18-24h；再以濃度為30％-100％的乙醇為溶劑，以流速10-15ml/min，滲漉提取，得到苦豆子中所含生物堿成分；至滲漉提取液與碘化鉍鉀反應(yīng)無(wú)顏色變化時(shí)停止?jié)B漉，分離滲漉液與殘?jiān)蝗】喽棺犹崛】喽棺由锟倝A后的藥渣，晾干備用；

(3)水提：向步驟(2)晾干后的固體產(chǎn)物中加入體積為該固體產(chǎn)物6-15倍量的水，于60-110℃，回流1-5h得水提物；

(4)醇沉：將步驟(3)得到的水提物于35-90℃減壓濃縮成密度為1.02-1.1的液體，加入乙醇至乙醇終濃度為40-90％醇沉，4℃冰箱放置10-48h，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀，得苦豆子粗糖提取物，粗糖提取物經(jīng)水復(fù)溶后，再加入乙醇至濃度為70％-90％放置10-48h，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀，冷凍干燥得棕褐色苦豆子粗糖粉末；

(5)酶解、脫色及除蛋白：取上述苦豆子粗糖粉末按比例添加淀粉酶，于85-95℃保溫20-40min；加質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為1-3％的活性炭于40-70℃回流30-50min脫色、以2000-5000r/min速率離心；取上清液采用Sevage法脫蛋白，重復(fù)3-5次，取水層濃縮、醇沉、離心、冷凍干燥，得到灰白色粉末；

(6)柱層脫色分離：將上述灰白色粉末和載體按重量比為1∶10-100的比例上樣，采用濃度為0.01％-2％的醋酸銨溶液或氯化鈉溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析24-48h，醇沉，過(guò)夜，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀冷凍干燥，得到白色苦豆子多糖粉末。

(7)柱層純化分離：將上述白色苦豆子多糖粉末和載體按重量比為1∶10-100的比例上樣，采用濃度為0.01％-2％的醋酸銨溶液或氯化鈉溶液洗脫液梯度洗脫，將洗脫液濃縮，透析24-48h，醇沉，過(guò)夜，以2000-5000r/min速率離心，取沉淀冷凍干燥，得到苦豆子多糖。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取多糖的方法，其特征在于所述柱層脫色分離的載體為選自納米大孔氧化鋁、纖維素DEAE-52以及NKA、NKA-II、AB-8、S-8、X-5、H103、D301R、D201、001×7型樹(shù)脂中的一種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取多糖的方法，其特征在于所述樹(shù)脂經(jīng)過(guò)下述步驟預(yù)處理：

a、將納米氧化鋁大孔樹(shù)脂先用蒸餾水浸泡過(guò)夜，傾去上層水液及其中的輕質(zhì)小分子，然后在100℃條件下烘烤2h，放干燥器中冷卻過(guò)夜；使用前將此樹(shù)脂浸入0.2mol/L的氯化鈉或醋酸銨溶液中1-2h，待用；

b、將DEAE-52等樹(shù)脂用蒸餾水充分淋洗，然后再用濃度為85％-95％的乙醇溶液浸泡24h濾出樹(shù)脂，并用濃度為85％-95％的乙醇溶液反復(fù)沖洗樹(shù)脂至洗出液無(wú)色，然后用濃度為5％HCl溶液浸泡2-4h，并用蒸餾水洗至中性；最后用濃度為2％NaOH溶液浸泡2-4h，并用蒸餾水洗至中性。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取多糖的方法，其特征在于所述洗脫液為濃度分別為0.02mol/L、0.3mol/L、0.5mol/L醋酸銨溶液或濃度分別為0.01mol/L、0.1mol/L、0.2mol/L、0.5mol/L氯化鈉溶液。