[發明專利]量子點標記過氧化氫酶熒光探針的制備方法

有效

• 申請號: 201110006683.8
• 申請日: 2011-01-13
• 公開（公告）號: CN102169090A
• 公開（公告）日: 2011-08-31
• 發明（設計）人: 周培疆;陳馳;何振宇;史廣宇
• 申請（專利權）人: 武漢大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 王敏鋒

1.一種CdTe量子點標記過氧化氫酶熒光探針的制備方法，其步驟如下：

制備碲氫化鉀溶液：通過硼氫化鉀還原碲粉制備，反應方程式如下：

???????4KBH₄?+?2Te?+?7H₂O?→?2KH₄Te?+?K₂B₄O₇?+11H₂↑

分別稱取0.337g的硼氫化鉀和0.319g的碲粉于具塞試管中，向硼氫化鉀中加入5mL高純水，至白色粉末完全溶解，后與碲粉混合，塞上塞子，于3--5℃下反應8~16h，得紫黑色液體，取上清1ml，用無氧高純水定容至100ml，為0.005mol/L的碲氫化鉀溶液；

B、稱取0.228g氯化鎘晶體，用高純水溶解定容至100mL，得0.01mol/L的氯化鎘溶液；

C、稱取0.092g巰基乙酸，用高純水稀釋定容至100mL，得0.01mol/L的巰基乙酸溶液；

D、取無氧高純水250mL，在攪拌和不斷通入高純氮氣的條件下，依次分別加入50mL0.01mol/L的氯化鎘溶液、60mL0.01mol/L的巰基乙酸溶液，用5mol/L的氫氧化鈉溶液調節pH值為10.5~11.5，后加入40mL碲氫化鉀?溶液，反應4-6min；

E、將（D）步驟的混合液以每罐50ml分裝于聚四氟乙烯消解罐中，于100℃下微波加熱10-20min，即制得濃度為1?mmol/L?CdTe量子點，氯化鎘、碲氫化鉀、巰基乙酸的摩爾比率分別為?2.5：1：3；

F、取4mL制備好的濃度為1?mmol/L?CdTe量子點，加入0.2mL0.5g/L的N-羥基琥珀酰亞胺于37℃恒溫振蕩0.5-1h，使偶聯劑N-羥基琥珀酰亞胺的羥胺基與CdTe量子點的羧酸基進行酯化反應，后加入0.5mL4×10^-10?mol/L的過氧化氫酶溶液，于25~35℃下振蕩40~60min后，加入0.3mL、0.1mol/L的L-甘氨酸終止交聯，制得量子點標記過氧化氫酶熒光探針。