[發明專利]聚酰胺胺、其部分降解產物或其復合物-Math1基因納米微粒以及在治療耳聾的應用

在審

• 申請號: 201110005066.6
• 申請日: 2011-01-04
• 公開（公告）號: CN102586300A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 楊仕明;吳南;吳雁;韓東;郭維維;趙立東;翟所強;高維強;楊偉炎
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍總醫院
• 主分類號: C12N15/63
• 分類號: C12N15/63;A61K48/00;A61P27/16
• 代理公司: 北京律誠同業知識產權代理有限公司 11006
• 代理人: 祁建國;梁揮

1.一種聚酰胺胺-Math1基因納米微粒，包括聚酰胺胺和圖4所示的質粒，其粒徑為100-200nm，分散指數為0.10-0.25，zeta電位約為10-50mV，包封率為90-95％。

2.一種聚酰胺胺部分降解產物-Math1基因納米微粒，包括聚酰胺胺部分降解產物和圖4所示的質粒，其粒徑為100-200nm，分散指數為0.10-0.25，zeta電位約為10-50mV，包封率為90-95％，該部分降解產物是通過對完整聚酰胺胺分子熱處理獲得的。

3.一種聚酰胺胺復合物-Math1基因納米微粒，包括聚酰胺胺復合物和圖4所示的質粒，其粒徑為100-200nm，分散指數為0.10-0.25，zeta電位約為10-50mV，包封率為90-95％，該復合物是由聚酰胺胺或其部分降解產物與環糊精混合獲得的，該部分降解產物是通過對完整聚酰胺胺分子熱處理獲得的。

4.一種納米微粒的制備方法，其通過在室溫下將聚酰胺胺、聚酰胺胺部分降解產物或聚酰胺胺復合物的水溶液與含Math1基因質粒的PBS溶液進行復凝聚而獲得納米微粒混懸液，所述部分降解產物是通過對完整聚酰胺胺分子熱處理獲得的，所述復合物是由聚酰胺胺或其部分降解產物與環糊精混合獲得的，所述含Math1基因的質粒為圖4所示的質粒。

5.根據權利要求4的方法，其特征在于，包括：

(1)制備濃度為500-1500μg/ml的聚酰胺胺或其部分降解產物的水溶液或聚酰胺胺復合物的水溶液；

(2)制備濃度為120-720μg/ml的含Math1基因的質粒的PBS溶液；

(3)以聚酰胺胺氨基/質粒磷酸基比為30∶1至1∶10混合步驟(1)、(2)的溶液以進行復凝聚反應得到聚酰胺胺-Math1基因納米微粒混懸液、聚酰胺胺部分降解產物-Math1基因納米微粒混懸液，或聚酰胺胺復合物-Math1基因納米微粒混懸液。

6.根據權利要求4或5的方法，其特征在于，所述聚酰胺胺的分子量是500Da～1000000Da。

7.根據權利要求4或5的方法，其特征在于，所述熱處理是在50-100℃下在水溶液中加熱2-48小時，所述聚酰胺胺或其部分降解產物與環糊精以質量比1∶10到10∶1混合。

8.權利要求4的方法制備的納米顆粒，其特征在于，所述納米顆粒的粒徑為100-200nm，分散指數為0.10-0.25，zeta電位約為10-50mV，包封率為90-95％。

9.根據權利要求1、2、3或8的納米顆粒在轉染體外培養的HEK293細胞、轉染離體培養的耳蝸組織或轉染在體耳蝸中的應用。