[發明專利]一株在高鹽環境中除去黃曲霉毒素B1的嗜鹽四聯球菌的使用

無效

• 申請號: 201110004940.4
• 申請日: 2011-01-12
• 公開（公告）號: CN102239976A
• 公開（公告）日: 2011-11-16
• 發明（設計）人: 黃鈞;李從虎;劉超蘭;周榮清
• 申請（專利權）人: 四川大學
• 主分類號: A23L1/015
• 分類號: A23L1/015;A23L1/22;C12N1/20;C12R1/01
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技術領域

本發明涉及一株在高鹽環境中除去AFB₁的嗜鹽四聯球菌，已經于2010年4月29日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（CGMCC）保藏，保藏編號為CGMCC?No.3792，屬于微生物領域。

背景技術

黃曲霉毒素是由黃曲霉（Aspergillus?flavus）和寄生曲霉（Aspergillus?parasiticus）等產生的次級代謝產物，黃曲霉毒素尤其是黃曲霉毒素B₁（AFB₁）具有較強的致癌作用，因此，各國在農產品、各種食品等原料與產品中的含量均有嚴格的限制。

自1960年發現黃曲霉毒素以來，世界各國科學家們均試圖尋求預防和除去黃曲霉毒素的有效途徑。目前除去黃曲霉毒素的方法主要有五類：①堿處理方法。Mukendi報道了使用亞硫酸鈉、硫酸氫鈉、氫氧化鈉、氨等化學試劑對黃曲霉毒素去毒的研究，并分析了影響這些化合物去毒效果的各種因素。該類方法適合應用于含水量較高的青綠、青貯飼料以及液態糧油，去毒效率高但不適合籽實、餅粕等固體飼料原料，而且處理后原料殘留有大量氨。由于該方法的設備投資大，成本高，已逐漸被淘汰。②氧化處理法。常用的氧化劑有次氯酸鈉、臭氧、過氧化氫、氯氣等。該方法具有較好的去毒效果，但是該方法的缺點在于處理效果不穩定，飼料中維生素等營養成分損失嚴重，處理成本較高。③吸附劑吸附毒素。常用的吸附劑包括酵母細胞壁、硅鋁酸鹽、活性炭等。但吸附劑不能解除黃曲霉毒素的毒性，它還可能同時吸附食品中的營養成分而降低營養物質的利用率，而且被吸附的毒素有可能在動物胃腸道中重新釋放。④抗氧化劑處理。這類抗氧化劑包括2-叔丁基對甲酚(BHA)、2,6-二叔丁基對甲酚(BHT)、異硫氰酸芐酯、2,2,4-三甲基-6-乙氧喹啉等。其機理是抗氧化劑能促進大鼠體內α-谷胱甘肽轉移酶-YC2?亞基的表達，有效地抑制了AFB₁與機體DNA?的結合。但是抗氧化劑的去毒作用有限，不能完全消除黃曲霉毒素中毒癥，而且BHT?等抗氧化劑濃度均超過常規使用量的30?倍以上才顯示較好的去毒效果，這樣對動物具有一定毒害作用。⑤高溫處理法。破壞AFB₁需要268℃以上的溫度，該方法能耗高且對食品中的營養成分破壞大，實際應用很少。

朱新貴等在幾種食品微生物除去黃曲霉毒素作用的研究（食品科學.2001，22：65～68）文中報道了乳酸菌、醋酸菌、面包酵母、釀酒酵母、米曲霉、枯草桿菌等對AFB₁具有除去作用。在30℃，添加AFB₁使其初始含量是10μg/ml，接種乳酸菌、醋酸菌和枯草芽孢桿菌的菌懸液，培養48h后，除去AFB₁的作用明顯。乳酸菌和枯草桿菌的除去作用分別達到82％和86％，培養60h后，其除去率分別達到88％和89％。但面包酵母和釀酒酵母的除去作用則不明顯。

本發明的目的就是采用一株能在高鹽環境中生長繁殖，且具有除去AFB₁能力的嗜鹽四聯球菌達到去除醬油、豆醬和豆瓣醬等生產過程中污染的AFB₁的目的。本發明使用的嗜鹽四聯球菌（Tetragenococcus?halophilus，保藏編號：CGMCC?No.3792），屬于益生菌類，安全可靠，含鹽濃度在6%?-20%?范圍生長繁殖良好，能有效除去被污染的醬油、豆醬等發酵醪中的AFB₁。

發明內容

為了減少AFB₁對人和動物的危害，減少真菌毒素對食品的污染，保證食品安全，本文通過對該菌株生物修復AFB₁，應用于生產實際中，AFB₁的去除率達到41.76%。

本發明嗜鹽四聯球菌的形態學特征為在固體培養基上菌落表面光滑，濕潤，邊緣整齊，中央隆起，直徑約為1mm，乳白色。液體培養無菌膜，菌液渾濁且有少量沉淀，革蘭氏染色陰性，細胞呈球形，二個平面分裂形成四聯狀。

本發明所要解決的技術問題是提供一株除去AFB₁效果較好的嗜鹽四聯球菌及其在AFB₁污染樣品上的應用。

本發明要求嗜鹽四聯球菌（T.?halophilus）的菌齡處于為對數初期，菌體濃度在使用對象中的初始濃度為5.0×10⁶?～1.5×10⁷?cfu/g(ml)，以濕基計。