[發明專利]一種花生生物活性肽的制備方法

有效

• 申請號: 201110004835.0
• 申請日: 2011-01-12
• 公開（公告）號: CN102174628A
• 公開（公告）日: 2011-09-07
• 發明（設計）人: 陳燕飛;亓培實;何東平;劉良忠;何莉萍;江思佳;黃迪惠;倪倩;劉雪姣;宋洋
• 申請（專利權）人: 武漢百信食品有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K4/10;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/18;A61P37/02
• 代理公司: 北京捷誠信通專利事務所(普通合伙) 11221
• 代理人: 魏殿紳;龐炳良

技術領域

本發明涉及一種植物蛋白質組合物的制備方法，尤其涉及一種花生生物活性肽的制備方法。

背景技術

花生是我國重要的油料作物，我國生產的花生除少部分作為干果食用之外，大部分是作為油料資源用于榨取食用油脂。榨油后所得占花生總重量56％～61％的花生餅粕中蛋白質含量為55％左右，其氨基酸組成較完全，含有大量人體必需氨基酸，營養價值可與FAO推薦的模式蛋白質相媲美。且資源豐富，價格低廉，是酶解制備生物活性肽的良好植物蛋白資源。花生餅粕多被用作飼料或肥料，尚未充分深加工利用，因而造成花生蛋白資源的極大浪費。如果對花生蛋白進行有限的酶解，可生產出高營養、高附加值且易于吸收的具有生物活性功能的生物制品。

肽是由氨基酸通過肽鍵連接而成的化合物，它是機體組織細胞的基本組成成分。科學家已在人體中發現了100多種生物活性肽，這些肽具有傳遞生理信息，調節生理功能的作用，對于人體的神經、消化、生殖、生長、運動、代謝、循環等系統的正常生理活動的維持非常重要，所有疾病的發生、發展、治療、康復都與多肽有關系。

花生肽是指花生蛋白經蛋白酶作用后，再經分離、精制等過程得到的蛋白質水解產物。花生肽具有較好的功能特性，如花生肽溶液在高濃度下黏度依然較低，能在較寬的pH值范圍內保持溶解狀態；具有較高的吸濕性和保濕性；滲透壓比氨基酸低得多；能抑制蛋白質形成凝膠，減少了由于花生蛋白大分子引起的過敏原性，增加了產品的穩定性等。此外，花生肽還具有抗氧化、抗疲勞、降血壓、提高機體免疫力等多種生理活性，可廣泛用于醫藥、保健食品、食品添加劑、調味品等多個領域，具有良好的應用前景。

花生餅中除了含有50～55％左右的花生蛋白外，還含有糖分、粗纖維、粗脂肪、水分、礦物質等其它成分。由于含有這些雜質成分，目前制備花生肽的工藝中，很少將花生餅直接作為原料來使用，不僅浪費了生產原料，還增加了生產成本。另外，在純化花生蛋白及制備花生肽的過程中，均有加酸堿調節pH的工序，因此，不可避免的代入大量鹽分，影響了最終產品的品質。第三，現有技術由于水解條件不同，花生肽的分子量也不同，而不同分子量的花生肽具有不同的生理功能，怎樣得到特定分子量的產品，并且提高該分子量產品的純度，從而使產品具有特定的生理功能，也是目前需解決的問題。

發明內容

本發明的目的是提供一種花生生物活性肽的制備方法。

本發明的花生生物活性肽的制備方法如下：

(A)將花生餅粉碎，過60～80目篩，用95％正己烷溶劑在50℃條件下浸泡2h，浸提后晾曬至正己烷試劑完全揮發，為脫脂花生餅粉末，待用；

(B)將步驟(A)中正己烷浸提之后的花生餅粉按1∶5～1∶10溶解至水中，加熱至45～55℃，用堿試劑調節pH至8.0～10.0，攪拌15min，在3000～4000r/min的轉速下，離心15min，取上清液；

(C)將步驟(B)的上清液加熱至70～90℃，用檸檬酸試劑調節pH至3.0～5.0，攪拌15min，在3000～4000r/min的轉速下，離心15min，收集沉淀，為花生蛋白；

(D)將步驟(C)中收集的沉淀按沉淀與水的質量比為1∶10～1∶20的比例溶解至水中，加熱至90～100℃，保持15～30min，然后冷卻至40～50℃，用NaOH試劑調節并保持pH在7.5～9.0，按照花生蛋白質量的2％～10％的質量，添加堿性蛋白酶Alcalase，酶解2～4h；

(E)待步驟(D)酶解結束后，迅速用HCl溶液調節pH至5.0～3.0，在3000～4000r/min的轉速下，離心15min，取上清液，為花生肽粗制液；

(F)將步驟(E)所得的花生肽粗制液注入儲槽中，溶液經微濾后通過分子量截留量為1000Da超濾膜，溶液中的小分子物質經中空纖維膜的內壁滲透出來成為超濾液，收集超濾液，為花生肽超濾液；溶液中的蛋白等大分子物質得以保留并得到濃縮，將濃縮液回收至步驟(D)中再次酶解；

(G)交換樹脂于去離子水中浸泡處理24小時后裝柱，然后分別用7.5％鹽酸和10％NaOH對其進行浸泡，轉化為H⁺型陽離子交換樹脂和OH^-型陰離子交換樹脂，再用去離子水清洗至pH為7.0左右，待用