[發明專利]一種花生生物活性肽的制備方法

有效

• 申請號: 201110004835.0
• 申請日: 2011-01-12
• 公開（公告）號: CN102174628A
• 公開（公告）日: 2011-09-07
• 發明（設計）人: 陳燕飛;亓培實;何東平;劉良忠;何莉萍;江思佳;黃迪惠;倪倩;劉雪姣;宋洋
• 申請（專利權）人: 武漢百信食品有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K4/10;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/18;A61P37/02
• 代理公司: 北京捷誠信通專利事務所(普通合伙) 11221
• 代理人: 魏殿紳;龐炳良

1.一種花生生物活性肽的制備方法，其特征在于包含如下步驟：

(A)將花生餅粉碎，過60～80目篩，用95％正己烷溶劑在50℃條件下浸泡2h，浸提后晾曬至正己烷試劑完全揮發，為脫脂花生餅粉末，待用；

(B)將步驟(A)中正己烷浸提之后的花生餅粉按1∶5～1∶10溶解至水中，加熱至45～55℃，用堿試劑調節pH至8.0～10.0，攪拌15min，在3000～4000r/min的轉速下，離心15min，取上清液；

(C)將步驟(B)的上清液加熱至70～90℃，用檸檬酸試劑調節pH至3.0～5.0，攪拌15min，在3000～4000r/min的轉速下，離心15min，收集沉淀，為花生蛋白；

(D)將步驟(C)中收集的沉淀按沉淀與水的質量比為1∶10～1∶20的比例溶解至水中，加熱至90～100℃，保持15～30min，然后冷卻至40～50℃，用NaOH試劑調節并保持pH在7.5～9.0，按照花生蛋白質量的2％～10％的質量，添加堿性蛋白酶Alcalase，酶解2～4h；

(E)待步驟(D)酶解結束后，迅速用HCl溶液調節pH至5.0～3.0，在3000～4000r/min的轉速下，離心15min，取上清液，為花生肽粗制液；

(F)將步驟(E)所得的花生肽粗制液注入儲槽中，溶液經微濾后通過分子量截留量為1000Da超濾膜，溶液中的小分子物質經中空纖維膜的內壁滲透出來成為超濾液，收集超濾液，為花生肽超濾液；溶液中的蛋白等大分子物質得以保留并得到濃縮，將濃縮液回收至步驟(D)中再次酶解；

(G)交換樹脂于去離子水中浸泡處理24小時后裝柱，然后分別用7.5％鹽酸和10％NaOH對其進行浸泡，轉化為H⁺型陽離子交換樹脂和OH^-型陰離子交換樹脂，再用去離子水清洗至pH為7.0左右，待用；

將步驟(F)中所得的花生肽超濾液，以5～10倍柱體積/h的流速通過H⁺型陽離子交換樹脂來脫除陽離子，待流出液pH＝4.0左右時停止加樣，之后將此流出液以同樣流速通過OH^-型陰離子交換樹脂來脫除陰離子，至流出液呈pH為7.0時停止加樣，收集為花生肽精制液；

(H)由步驟(G)中得到的花生肽精制液，減壓濃縮至固型物含量30％～40％；

(I)步驟(H)中的花生肽精制液經噴霧干燥或冷凍干燥制成花生肽干粉。