[發(fā)明專利]一種從桔核中提取活性成分的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110004630.2
• 申請日: 2011-01-11
• 公開（公告）號: CN102153615A
• 公開（公告）日: 2011-08-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 榮龍;劉燦;劉靜;榮永海;黃國倫
• 申請（專利權(quán)）人: 北京航空航天大學(xué)
• 主分類號: C07J73/00
• 分類號: C07J73/00;C11B1/10
• 代理公司: 北京永創(chuàng)新實專利事務(wù)所 11121
• 代理人: 官漢增

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物活性成分的提取分離技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從桔核中提取活性成分的方法。

背景技術(shù)

檸檬苦素類似物是桔核中一類生物活性成分，主要包括檸檬苦素酸性甙元、檸檬苦素、諾米林、檸檬苦素中性甙元(不包括檸檬苦素、諾米林)，均屬于三萜類物質(zhì)，在促進癌細胞凋亡、調(diào)控低密度脂蛋白、治療結(jié)腸癌、抗菌以及殺蟲等方面具有顯著的功效，因此檸檬苦素類似物的應(yīng)用開發(fā)具有巨大醫(yī)用價值和廣闊的市場前景。

目前，檸檬苦素及其類似物的提取分離工藝對有機溶劑用量大，產(chǎn)率低，加上成本因素，我國還無法實現(xiàn)檸檬苦素及其類似物規(guī)模化生產(chǎn)，造成大量桔核作為廢棄物丟棄，十分可惜。柑桔的深度加工，尤其是以桔核作為原料提取生物活性物質(zhì)并加以利用，是提高柑桔產(chǎn)業(yè)效益重要途徑。

從桔核中提取活性成分的技術(shù)主要存在三種問題：首先，提取的檸檬苦素或產(chǎn)率較低，或純度不高，且提取和純化的工藝有待完善；其次，提取過程中需采用大量有機溶劑如石油醚、丙酮、乙酸乙酯和乙醇等作為脫脂或提取溶劑，這些有機溶劑污染環(huán)境，且易燃易爆，不易保存；再次，目前的方法僅對桔核的單一成分進行了提取分離，未能將桔核中多種活性成分的提取分離進行有機結(jié)合，從而增加了生產(chǎn)成本。如公開號為CN?101580513A的專利：工業(yè)層析法制備檸檬苦素單體的工藝中記載了反復(fù)采用石油醚進行脫脂處理，然后采用醇類進行提取，環(huán)境污染嚴重，成本高，且沒有記載檸檬苦素的產(chǎn)率。如公開號為CN?101531666A的專利：一種從柚核中提取檸檬苦素的工藝中記載了以醇類有機溶劑作為提取溶劑，通過層析和結(jié)晶得到純度為92％，產(chǎn)率為0.25％的檸檬苦素，檸檬苦素產(chǎn)率和純度均較低，且有機溶劑用量大。如公開號為CN101367823A的專利：從吳茱萸中分離檸檬苦素、吳茱萸堿和吳茱萸次堿的方法中記載：通過有機溶劑萃取、柱層析、高效制備液相分離得到純度為99％的檸檬苦素，該提取工藝存在的問題：產(chǎn)率較低，僅為0.1％，且成本太高，只適合實驗制備，不能實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化。如公開號為CN101781355A的專利：檸檬苦素的制備方法及組合物和其應(yīng)用，該工藝得到檸檬苦素產(chǎn)率為1.68％，純度為98.5％，看似產(chǎn)率純度都較好，但提取方法是明顯有違背客觀事實之處，因為檸檬苦素為中低極性分子，在酸性條件下檸檬苦素是閉環(huán)不溶解于水的，也不溶解于冰醋酸，用冰醋酸不可能提取出檸檬苦素，通過溶解實驗?zāi)軌蜃C明檸檬苦素不溶解于醋酸。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明提出一種從桔核中提取活性成分的方法，該方法以廢棄桔核為原料，對其進行綜合利用，從中提取出活性成分即高純度的檸檬苦素，同時還可以獲得檸檬苦素酸性甙元、諾米林和檸檬苦素中性甙元等多種活性成分，該方法充分利用了桔核資源，具有產(chǎn)率高、安全、環(huán)保的特點。采用超臨界二氧化碳萃取的方法提取桔油，以及采用弱堿溶液取代有機溶劑作為提取溶劑，減少有機溶劑的使用，規(guī)避了有機溶劑提取時造成的易燃易爆問題，降低了生產(chǎn)成本，減少了環(huán)境的污染。在層析前進行超濾處理，清除了植物大分子蛋白，減輕了后續(xù)層析時壓力，減少樹脂用量。

本發(fā)明提出的一種從桔核中提取活性成分的方法，具體包括以下步驟：

第一步：桔核粉碎后提取桔油：

將桔核粉碎至60目以上后加入至超臨界二氧化碳提取器內(nèi)提取桔油，設(shè)置二氧化碳氣體壓力為30～32MPa，提取溫度為45～48℃，提取時間為1.5～2小時，得到桔油和去油桔核殘渣。

第二步：去油桔核殘渣進行浸泡及勻漿處理：

按照液固比為10～20ml/g的比例，利用蒸餾水浸泡去油桔核殘渣，并用堿溶液A調(diào)整pH值為8～11.5，在溫度為60～80℃下浸泡0.5～2h后，采用閃式提取器進行勻漿處理，轉(zhuǎn)速為3500～5500r/min攪拌破碎1～3min后，得到勻漿液。所述的浸泡的目的是使檸檬苦素及中性甙元在堿性條件下轉(zhuǎn)型為水溶性分子。所述的堿溶液A優(yōu)選為濃度3～5M的NaOH溶液。

第三步：將勻漿液進行離心分離處理：

將勻漿液放置于離心機中，在轉(zhuǎn)速4000～5000r/min下離心分離10～20min，得到上清液A。

第四步：對上清液A進行超濾處理：

將上清液A利用超濾器進行超濾處理，使用的濾膜的截留分子量為6000～10000，收集得到濾液。

所述的超濾處理的目的為去除上清液A中大分子蛋白，避免了層析過程中，蛋白質(zhì)對樹脂競爭性吸附。

第五步：將濾液進行層析：