[發明專利]匐枝青蘚配子體離體快繁方法無效
| 申請號： | 201110004042.9 | 申請日： | 2011-01-11 |
| 公開（公告）號： | CN102144545A | 公開（公告）日： | 2011-08-10 |
| 發明（設計）人： | 婁玉霞;曹同;郭水良 | 申請（專利權）人： | 上海師范大學 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 上海伯瑞杰知識產權代理有限公司 31227 | 代理人： | 楊杰民 |
| 地址： | 200234 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 匐枝青蘚 配子體 離體快繁 方法 | ||
1.一種匐枝青蘚配子體離體快繁方法，步驟如下：
(1)準確稱取下列物質，置入容器中混合、攪拌，制備培養基：
KNO3?250mg/L、MgSO4·7H2O?250mg/L、KH2PO4?250mg/L、Ca(NO3)2·4H2O?1000mg/L、酒石酸氨0.115mg/L、NaFe-EDTA?36.7mg/L、MnSO4·4H2O?11.15mg/L、H3BO3?3.1mg/L、KI?0.415mg/L、ZnSO4·7H2O4.3mg/L、CuSO4·5H2O?0.0125mg/L、NaMoO4·2H2O?0.125mg/L、CoCL2·6H2O0.0125mg/L；
(2)培養無菌配子體：
取自然環境中生長的匐枝青蘚配子體新生分枝表面消毒，接種到步驟(1)制備的培養基上，培養條件：溫度25±2℃；光照強度4000lx；光照時間12小時/天；培養10天，篩選獲得無菌配子體；
(3)培養新生配子體分枝：
A制備新生配子體培養基：
步驟(1)制備的培養基+0.1～2.0mg/L?6-芐氨基嘌呤+0.01～0.2mg/L萘乙酸+10g/L蔗糖，置入容器中混合、攪拌，制成；
B將步驟(2)培養的無菌配子體轉接到新生配子體培養基，培養條件：溫度20-35±2℃；光照強度4000lx；光照時間12小時/天；培養30天，獲得新生配子體分枝；
(4)配子體增殖擴繁：
A制備配子體增殖擴繁培養基：
步驟(1)制備的培養基+0～0.5mg/L?6-芐氨基嘌呤+0～0.05mg/L萘乙酸+10g/L蔗糖，置入容器中混合、攪拌，制成；
B將步驟(3)培養的新生配子體分枝切割成長0.3cm-0.5cm的切段，接種到配子體增殖擴繁培養基上，培養條件：溫度25±2℃；光照強度4000lx；光照時間12小時/天；培養30天，每個配子體切段可新生數量眾多的配子體分枝。
2.根據權利要求1所述的匐枝青蘚配子體離體快繁方法，其特征在于：?
步驟(2)中匐枝青蘚配子體新生分枝表面消毒為75％體積分數的酒精溶液30秒鐘和0.1％體積分數的升汞溶液3分鐘。
3.根據權利要求1所述的匐枝青蘚配子體離體快繁方法，其特征在于：步驟(4)B中選用匐枝青蘚配子體上新生的幼嫩分枝切割。?
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