[發明專利]一種鑒別卵磷脂純度的方法

有效

• 申請號: 201110003383.4
• 申請日: 2011-01-10
• 公開（公告）號: CN102175811A
• 公開（公告）日: 2011-09-07
• 發明（設計）人: 徐為民;王道營;卞歡;劉芳;張露娟;諸永志
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90;G01N30/94
• 代理公司: 揚州市錦江專利事務所 32106
• 代理人: 江平

技術領域

本發明屬于農產品質量檢測技術領域，特別涉及卵磷脂純度的鑒別方法。

背景技術

卵磷脂是重要的營養補充劑和食品添加劑，不同的提取純化工藝對卵磷脂的純度影響很大，同時卵磷脂在貯存過程中或在酶的作用下會發生水解，水解程度的不同也會影響產品的純度，產品純度直接影響其功能特性。卵磷脂純度鑒別可采用薄層層析法（TLC）、柱層析、高效液相色譜法和核磁共振檢測方法。國外通常采用高效液相色譜或核磁共振法對卵磷脂純度進行分析，盡管分析結果準確，但設備價格昂貴；國內一般采用的柱層析法，其檢測周期長、耗用的試劑量大、原料浪費嚴重；所以對卵磷脂純度的鑒別，一直是困擾科研和生產的難題。

經典的薄層層析法不僅設備要求簡單、操作方便、分離條件易于掌握，而且結果直觀，適合于卵磷脂的純度鑒別。通常使用薄層層析法對卵磷脂成分進行分析時，主要局限于對其具體組分或脂肪酸構成進行分析，卵磷脂的分析范圍較窄（主要局限于幾種磷脂或其分子種），不能兼顧甘油酯及其水解產物脂肪酸和溶血卵磷脂，因此很大程度上限制了運用該方法對卵磷脂純度及其水解程度的鑒別。

發明內容

本發明的目的是提供一種方便操作、直觀、準確地鑒別卵磷脂純度的方法。

本發明操作步驟是：

1）將卵磷脂樣品用氯仿溶解，配制成濃度為5mg/mL的卵磷脂溶液；

2）將上述卵磷脂溶液點樣于距一矩形薄層層析板底端1.0cm處，使點樣下方的薄層層析與展開劑液面接觸，當展開劑上緣距離薄層層析板頂端1.3cm時立即取出薄層層析板，待薄層層析板上展開劑涼干后，再將薄層層析板完全浸泡于顯色劑中，然后取出；

3）薄層層析板上的卵磷脂、脂肪酸和甘油酯、溶血卵磷脂的顯色斑點分別是黃色、白色和乳黃色，將薄層層析板掃描后測量出卵磷脂、脂肪酸和甘油酯、溶血卵磷脂的面積分別為S、S₁和S₂，卵磷脂的純度=????????????????????????????????????????????????×100%；

特點是：本發明所述展開劑由氯仿、甲醇、異丙醇、水和三乙胺組成，所述氯仿：甲醇：異丙醇：水和三乙胺的體積比為23：9：1：1：0.67；本發明所述顯色劑由溴百里香酚藍、NaOH和水組成，所述溴百里香酚藍、NaOH分別占顯色劑總質量的0.035%和0.36%。

本發明采用的薄層層析法，使用高效展開劑，使卵磷脂主要成分、脂肪酸和溶血卵磷脂在10cm的薄層層析板上得到快速分離，然后采用顯色劑確定顯示各種成分和面積，再通進計算，得到卵磷脂的純度。

本發明有益效果：（1）設備要求簡單，僅需簡單的薄層層析裝置，在普通的實驗室中就能完成；（2）檢測周期短，整個實驗流程20min內即可完成；（3）結果直觀，卵磷脂、甘油酯、卵磷脂的顯色圖面積，能直接觀測到卵磷脂的純度。

附圖說明

圖1?卵磷脂及相關組分顯色區域的薄層層析色譜示意圖。

具體實施方式

操作：

（1）稱取500mg卵磷脂樣品，用氯仿溶解并定容至100mL，配制成5mg/mL的溶液；

（2）將上述卵磷脂溶液點樣于距一矩形薄層層析板底端1.0cm處，使點樣下方的薄層層析與展開劑液面接觸，當展開劑上緣距離薄層層析板頂端1.3cm時立即取出薄層層析板，待薄層層析板上展開劑涼干后，再將薄層層析板完全浸泡于顯色劑中，然后取出；

（3）可觀察至薄層層析板上的卵磷脂、脂肪酸與甘油酯、溶血卵磷脂的顯色斑點分別是黃色、白色、乳黃色，將薄層層析板掃描后測量出其面積分別為36mm²、4mm²和4mm²；

（4）計算：卵磷脂的純度=×100%=81.82%。