[發(fā)明專利]一種山羊草屬殺配子染色體2C特異SCAR標(biāo)記

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110002658.2
• 申請(qǐng)日: 2011-01-07
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102146444A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-08-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郭長(zhǎng)虹;徐國(guó)輝;束永俊;叢雯雯;郭東林
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 哈爾濱師范大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;任鳳華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種山羊草屬殺配子染色體2C特異SCAR標(biāo)記，尤其涉及一種檢測(cè)小麥遺傳背景下殺配子染色體2C的試劑盒及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

小麥?zhǔn)鞘澜缟现匾募Z食作物之一。在中國(guó)它是僅次于水稻的第二大農(nóng)作物，小麥生產(chǎn)對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)發(fā)展有著十分重要的戰(zhàn)略意義。由于小麥栽培品種單一化，使其遺傳基礎(chǔ)日益狹窄，抗源匱乏，極大地限制了其產(chǎn)量和品質(zhì)的進(jìn)一步改良。小麥的近緣物種中存在著大量的遺傳變異，是小麥改良可以利用的有益基因資源，將這些有益基因?qū)胄←溡恢笔沁z傳學(xué)家和育種學(xué)家經(jīng)久不衰的研究課題。創(chuàng)制易位系是把外源有益基因?qū)胄←湹囊环N有效途徑。常用的創(chuàng)制易位系的方法有：自發(fā)易位、輻射誘發(fā)、利用Ph基因、染色體錯(cuò)分裂與著絲點(diǎn)再融合、組織培養(yǎng)以及利用殺配子染色體等。國(guó)內(nèi)外的研究都已證明，利用殺配子染色體誘導(dǎo)產(chǎn)生易位的頻率要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其它方法。

山羊草屬植物中的一些殺配子染色體，當(dāng)單體附加到不同基因型普通小麥中時(shí)，具有完全或不完全的殺配子作用，在不完全殺配子作用下，可高頻誘導(dǎo)各種類型的染色體結(jié)構(gòu)變異，變異頻率可達(dá)10％以上，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于自發(fā)易位、輻射誘發(fā)、Ph基因等其他方法的誘導(dǎo)效率。這些殺配子染色體是經(jīng)長(zhǎng)期自然選擇保留下來(lái)的，有的與小麥有部分同源關(guān)系，在誘導(dǎo)染色體結(jié)構(gòu)變異中有特殊的意義。殺配子染色體不僅可誘導(dǎo)普通小麥染色體結(jié)構(gòu)變異，而且對(duì)附加或代換到普通小麥中的外源染色體也具有同樣的功能，這就為小麥的誘變育種開(kāi)辟了一條新途徑。殺配子染色體起源于不同的基因組(C，S或M)，就同祖性來(lái)說(shuō)，現(xiàn)已識(shí)別出三種類型的山羊草殺配子染色體：同祖群2中的殺配子染色體Ae.longissima(2)、Ae.sharonensis、Ae.cylindrica、Ae.speltoides(1)和Ae.speltoides(2)；同祖群3中的殺配子染色體Ae.triuncialis(1)和Ae.triuncialis(2)；同祖群4中的殺配子染色體Ae.longissima(1)、Ae.longissima(3)、Ae.sharonensis(2)和Ae.sharonensis(3)。

殺配子染色體效應(yīng)的強(qiáng)度是多樣的，從致死到半致死，而且也受不同小麥的遺傳背景的影響，其作用特點(diǎn)、方式也各不相同。染色體2S^lo，2S^sh，T2B-2S^sp.au，4S^lo，4S^sh，4S^sh#2，在“中國(guó)春”小麥中引起不帶這些染色體的配子完全不育，因此無(wú)法傳遞給下一代。3C染色體在“中國(guó)春”中發(fā)揮很強(qiáng)的殺配子效應(yīng)，但在其它品種中卻產(chǎn)生溫和的、半致死效應(yīng)，暗示在這些栽培品種中仍存在阻遏基因。染色體T2B-2S^sp.li，2C，3C^SAT和4M^g，在中國(guó)春中誘導(dǎo)半致死效應(yīng)的染色體斷裂，而且結(jié)構(gòu)重排的染色體可以被保留和分離。染色體3C和3C^SAT都起源于離果山羊草，但是它們的殺配子效應(yīng)強(qiáng)度在“中國(guó)春”中卻不相同；其中3C的效應(yīng)是致死的，而3C^SAT則是半致死的。

殺配子染色體2C在普通小麥“中國(guó)春”等遺傳背景下可誘導(dǎo)半致死效應(yīng)的染色體斷裂，使后代產(chǎn)生易位、缺失等染色體結(jié)構(gòu)畸變。利用殺配子染色體2C在構(gòu)建大麥染色體缺失圖譜，誘導(dǎo)小麥-偃麥草、小麥-冰草易位等方面取得了很好的成效。在殺配子染色體2C的利用過(guò)程中，雜種后代中2C染色體的鑒定是非常重要的環(huán)節(jié)。有很多學(xué)者利用分帶的方法對(duì)后代進(jìn)行鑒定，但該方法非常繁瑣，而且需要結(jié)合相關(guān)的細(xì)胞學(xué)技術(shù)。與之相比，利用DNA分子標(biāo)記進(jìn)行鑒定則是十分方便快捷的途徑。

隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(RAPD)技術(shù)具有操作簡(jiǎn)單、模板DNA用量少、擴(kuò)增產(chǎn)物多態(tài)性高、經(jīng)濟(jì)快捷等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于遺傳多樣性分析、品種鑒定、分子標(biāo)記輔助育種、基因定位及遺傳圖譜構(gòu)建等多個(gè)研究領(lǐng)域。但由于它的重復(fù)性和穩(wěn)定性較差，將RAPD標(biāo)記轉(zhuǎn)化為SCAR標(biāo)記后，其特異性和穩(wěn)定性大幅度提高，可以更方便快捷地應(yīng)用于異源染色體的檢測(cè)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種檢測(cè)小麥遺傳背景下殺配子染色體2C的試劑盒。

本發(fā)明提供的試劑盒，包括如下引物對(duì)：

所述引物對(duì)中的一條引物為序列表中的序列3所示的核苷酸，所述引物對(duì)中的另一條引物為序列表中的序列4所示的核苷酸。