[發明專利]一種山羊草屬殺配子染色體2C特異SCAR標記無效
| 申請號: | 201110002658.2 | 申請日: | 2011-01-07 |
| 公開(公告)號: | CN102146444A | 公開(公告)日: | 2011-08-10 |
| 發明(設計)人: | 郭長虹;徐國輝;束永俊;叢雯雯;郭東林 | 申請(專利權)人: | 哈爾濱師范大學 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人: | 關暢;任鳳華 |
| 地址: | 150025 黑龍江省哈*** | 國省代碼: | 黑龍江;23 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 山羊 草屬殺 配子 染色體 特異 scar 標記 | ||
1.一種檢測植物殺配子染色體2C的試劑盒,包括如下引物對:
所述引物對中的一條引物為序列表中的序列3所示的核苷酸,所述引物對中的另一條引物為序列表中的序列4所示的核苷酸。
2.根據權利要求1所述的試劑盒,其特征在于:
所述植物為含有殺配子染色體2C的小麥屬植物,所述含有殺配子染色體2C的小麥屬植物具體為“中國春”-長穗偃麥草7E二體附加系與“中國春”-殺配子染色體2C二體附加系雜交得到的F1代和/或所述F1代自交得到的F2代。
3.一種檢測植物殺配子染色體2C的PCR試劑,由如下引物對、dNTP、氯化鎂、DNA聚合酶和PCR緩沖液組成:
所述引物對中的一條引物為序列表中的序列3所示的核苷酸,所述引物對中的另一條引物為序列表中的序列4所示的核苷酸。
4.根據權利要求3所述的PCR試劑,其特征在于:
所述引物對中各引物在所述PCR試劑中的濃度均為0.5μM;
所述dNTP在所述的PCR試劑中的濃度為0.18mM,所述DNA聚合酶在所述的PCR試劑中的濃度為0.06U/μl;所述氯化鎂在所述的PCR試劑中的濃度為0.18mM;
所述植物為含有殺配子染色體2C的小麥屬植物。
5.根據權利要求3或4所述的PCR試劑,其特征在于:
所述含有殺配子染色體2C的小麥屬植物為“中國春”-長穗偃麥草7E二體附加系與“中國春”-殺配子染色體2C二體附加系雜交得到的F1代和/或所述F1代自交得到的F2代。
6.權利要求1或2所述試劑盒或權利要求3-5中任一所述的PCR試劑在檢測小麥殺配子染色體2C中的應用。
7.一種輔助檢測待測植物中是否含有殺配子染色體2C的方法,包括如下步驟:用權利要求1或2所述試劑盒中的引物對或權利要求3或4中所述的PCR試劑對待測植物進行PCR擴增,得到PCR擴增產物;檢測所述PCR擴增產物,若所述PCR擴增產物中含有大小為586bp,則所述待測植物中候選含有殺配子染色體2C,若所述PCR擴增產物中不含有大小為586bp的片段,則所述待測植物中候選不含有殺配子染色體2C。
8.根據權利要求7所述的方法,其特征在于:
所述PCR擴增中,以待測植物的基因組DNA為模板;
所述PCR擴增的退火溫度為53℃。
9.根據權利要求7或8所述的方法,其特征在于:
所述PCR擴增產物的核苷酸序列為序列表序列2自5’末端第405-990位核苷酸。
10.根據權利要求7-9中任一所述的方法,其特征在于:
所述檢測PCR擴增產物的方法為瓊脂糖凝膠電泳或測序。
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