[發明專利]雙抗體夾心酶聯免疫分析試劑盒及其生產方法

無效

• 申請號: 201110002499.6
• 申請日: 2011-01-07
• 公開（公告）號: CN102175848A
• 公開（公告）日: 2011-09-07
• 發明（設計）人: 李學斌
• 申請（專利權）人: 武漢伊艾博科技有限公司
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司 42104
• 代理人: 涂潔

1.一種雙抗體夾心酶聯免疫分析試劑盒的生產方法，包括以下步驟：

(1)抗原拆分：將含有兩個以上抗原表位的完整抗原拆分成兩個部分，每個部分為至少包含一個完整的有效抗原表位的完全抗原；

(2)動物免疫及其檢測：將上述兩個完全抗原分別進行動物免疫，并采用酶聯免疫分析法檢測動物免疫效果，分別得到兩份相應的ELISA效價不低于1∶100,000的動物免疫血清；

(3)親和層析提取：將上述兩份動物免疫血清分別通過完整抗原親和層析方法提取出兩份針對各自完全抗原的抗體；

(4)制備檢測抗體和固相載體：將其中一份抗體經過生物素標記用于制備檢測抗體，另一份抗體用于制備固相載體。

(5)按照雙抗體夾心酶聯免疫分析法要求以完整抗原為標準品組裝試劑盒。

2.如權利要求1所述的生產方法，其特征在于，所述步驟(1)中完整抗原拆分的方法為：對于蛋白質抗原可以通過多肽合成、分段重組表達或蛋白酶切方法實現蛋白質抗原的拆分；對于化合物大分子抗原可以通過化學合成或化學分解實現化合物大分子抗原拆分。

3.如權利要求1或2所述的生產方法，其特征在于，所述步驟(1)中拆分后的兩部分中任一部分分子量小于20kDa時，則通過添加載體制備成完全抗原后再進入步驟(2)。

4.如權利要求1或2所述的生產方法，其特征在于，所述步驟(2)中酶聯免疫分析法為：以未拆分的完整抗原作為包被抗原制備固相載體，免疫血清稀釋后與包被有完整抗原的固相載體共同反應，反應結束后洗滌，加抗被免疫動物的酶標抗體，底物顯色，終止后讀取吸光值判斷抗體效價。

5.一種雙抗體夾心酶聯免疫分析試劑盒，其特征在于，由權利要求1-4任一項生產方法制得。