[發明專利]涉及使用磁性顆粒的測定方法和裝置

有效

• 申請號: 201080057103.1
• 申請日: 2010-10-18
• 公開（公告）號: CN102753972A
• 公開（公告）日: 2012-10-24
• 發明（設計）人: I.門德爾-哈特維希
• 申請（專利權）人: 阿米克股份公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 孔青;李進

發明領域

本發明涉及診斷測定領域，具體地講涉及其中待檢測分析物存在于復雜生物樣品中的開放式或至少部分開放式側向流動測定(lateral?flow?assay)。本發明根據使用磁性顆粒作為攜帶俘獲分子的固相可供獲得改進處理樣品的裝置和方法；例如改進反應動力學，從而改進測定的靈敏度。

發明背景

現今，診斷測定對于許多疾病的診斷、治療和管理極為普及并十分重要。為了簡化對例如血液、血清、血漿、尿液、唾液、組織活檢、糞便、痰和皮膚或咽拭子等臨床樣品中各種分析物的檢測，多年來已開發出不同類型的診斷測定。通常預期這些測定給出快速可靠的結果，同時又容易使用，而且制造成本低廉。可以理解的是，在一種測定和相同測定中難以滿足所有的這些要求。在實踐中，許多測定受限于其速度。另一個重要參數是靈敏度。測定技術的最新發展導致越來越靈敏的測試，允許檢測痕量的分析物，并且以盡可能最短的時間檢測樣品的疾病標志物。

一次性測定裝置的最普通類型由接受樣品的區或區域、反應區和任選分別連接接受區和反應區的運輸區或溫育區組成。這些測定裝置稱為層析測定裝置或簡稱為測試條(test?strip)。它們采用多孔材料例如過濾材料，多孔材料限定能夠支持毛細流動的液體流動路徑。

樣品接受區常由能夠吸收樣品的更多孔的材料組成，當需要分離血細胞時，還有效地捕集紅細胞。這類材料的實例為纖維材料，例如紙、羊毛狀物、凝膠或織物(tissue)，其包含例如纖維素、羊毛、玻璃纖維、石棉、人造纖維、聚合物或其混合物。

運輸區或溫育區通常由相同或類似的材料組成，常具有不同于樣品接受區的孔隙率。同樣地，反應區通常由類似的吸收纖維材料或任何上文列出的材料組成，反應區可與溫育區整合，或構成其最遠端的組成部分。

在測定裝置或測試條(strip?test)中，一種或多種多孔材料被裝配在載體上，例如熱塑材料、紙、硬紙板等的條帶上。此外，可提供覆蓋物，所述覆蓋物具有至少一個接受樣品的口和一個允許讀取測定結果的口或透明區。

硝化纖維材料常用作構成運輸區或反應區、連接接受區和反應區的基質。用硝化纖維的一個重大缺點是其對蛋白質和其它生物分子的高的非特異性結合。然而，目前的測試條常處理眾多樣品，減少了這種結合的影響。然而，需要使樣品體積減至最小，符合使整個測試小型化的趨勢，包括在不損害準確性和可靠性的情況下使試劑的量最小化。

一種具體的測定裝置類型是無孔測定，例如WO?03/103835、WO?2005/089082、WO?2005/118139和WO?2006/137785中公開的開放式側向流動裝置。

WO?03/103835簡單提到在具有毛細結構以促進或驅動液體沿所述結構進行毛細流動的測定裝置中并入“加工區室、元件和/或裝置”。這些“加工區室、元件和/或裝置”包括“捕集所述液體的磁性組分”的磁性部件。此外，WO?2003/103835教導了“還可在流動路徑中或在流動路徑附近安置用于檢測磁性物質的磁體或部件。因此，磁性顆粒可被捕集并保留在結構中需要的位置上，顆粒的磁性因此可用作成功運輸到系統特定點上的標志物或指示物。此外，磁性顆粒可用具有生物親和力的物質包覆，并且用于不同類型的測定”。WO?2003/103835的教導集中在利用磁性能作為另一種標志物。雖然提出磁性顆粒還可用作載體，例如用具有生物親和力的物質包覆，但是WO?2003/103835未表明如何將之付諸實踐。

WO?2005/089082提到在無孔測定中使用磁性顆粒，其中利用磁性部件分離出樣品的不需要的組分。

WO?2006/134546涉及在包括至少一個敏感表面的敏感裝置中使用磁性標記，敏感表面包含至少一類結合部位，其能夠與連接磁性標記的至少一類生物實體特異性連接。敏感裝置還包含至少一個磁性傳感器元件，敏感裝置還包含區分部件，用于以時間分辨的方式將特異性連接結合部位的磁性標記與非特異性連接的標記區分開來。

WO?2007/110779公開了一種測定方法和裝置，其中樣品與磁性敏感性顆粒混合，且其中可通過施加的磁場操作所述顆粒。

WO?2007/129275描述了一種系統，其中磁性顆粒在反應室內越過傳感器表面移動，其中分析物特異性探針或分析物類似物與傳感器表面結合。

US?2008160630公開了一種用于檢測樣品中的分析物的裝置，所述裝置包括具有樣品區、清潔區和檢測區的流體網絡。分析物與利用微線圈陣列或機械可移動的永磁體在流體網絡內移動的磁性顆粒相互作用。