[發明專利]用于檢測幽門螺桿菌和/或克拉霉素抗性特征的肽核酸探針，試劑盒和方法及應用

無效

• 申請號: 201080048320.4
• 申請日: 2010-09-13
• 公開（公告）號: CN102597267A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: N·F·里貝羅品托德奧利維拉阿澤維多;L·I·馬茨埃拉瑟魁拉;N·R·托雷斯法里亞;M·J·洛普斯達哥斯達維埃拉
• 申請（專利權）人: 米尼奧大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 羅菊華

1.用于檢測幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori)株的存在，或幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori)對克拉霉素的應答的檢測，或幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori)和其對克拉霉素的應答的檢測的PNA探針，其包含至少86％結構上類似于SEQ?ID?NO：1～4的核苷酸序列中的至少一種。

2.權利要求1的PNA探針，其能在幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori)的rRNA，rDNA或互補rRNA序列中檢測靶序列。

3.權利要求1的PNA探針，其當包含至少86％結構上類似于SEQ?ID?NO：1～3的核苷酸序列中的至少一種時能檢測克拉霉素抗性。

4.權利要求1的PNA探針，其當包含至少86％結構上類似于SEQ?ID?NO：4的核苷酸序列中的至少一種時能檢測克拉霉素感受性。

5.權利要求1～4中任一項的PNA探針，其中其至少連接到一種可檢測的級分。

6.權利要求5的PNA探針，其中探針的可檢測的級分的類型選自以下組：綴合物，分支的檢測系統，生色團，熒光團，放射性同位素，酶，半抗原或發光化合物。

7.權利要求6的PNA探針，其中熒光團基團是下列中的至少一種：熒光團Alexa系列，Alexa?Fluor系列，花青苷，5-(及-6)羧基-2’，7′-二氯熒光素，5-ROX(5-羧基-X-若丹明，三乙基銨鹽)。

8.用于檢測生物學樣品中幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori)株的存在，或幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori)對克拉霉素的應答的檢測，或幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori)和其對克拉霉素的應答的檢測的試劑盒，其包含權利要求1～7中任一項的探針中的至少一種。

9.權利要求8的試劑盒，其包含下列溶液中的至少一種：一種固定溶液，一種雜交溶液及一種洗滌溶液。

10.權利要求8或9中任一項的試劑盒，其中固定溶液包含多聚甲醛和乙醇，即，2～8％(wt/vol)的多聚甲醛和25～75％(vol/vol)的乙醇。

11.權利要求9的試劑盒，其中雜交溶液包含甲酰胺。

12.用于在生物學樣品中幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori)的檢測，或幽門螺桿菌(H.pylori)對克拉霉素的應答的檢測或幽門螺桿菌(H.pylori)和其對克拉霉素的應答的檢測的方法，包括使用前述權利要求中任一項的PNA探針中的至少一種，及包括下列步驟：

(a)PNA探針與所述樣品接觸；

(b)PNA探針與存在于所述樣品中的微生物的靶序列雜交；

(c)作為所述檢測的指示及所述樣品的測量檢測雜交。

13.權利要求10的方法，其中生物學樣品源于血，空氣，食品，水，活組織檢查或胃活組織檢查。

14.權利要求12的方法，其中雜交通過熒光呈現。

15.權利要求1～7中任一項的PNA探針待應用于在生物學樣品中檢測幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori)，或幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori)對克拉霉素的應答的檢測，或幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori)和其對克拉霉素的應答的檢測的方法的用途。

16.權利要求8～11中任一項的試劑盒待應用于在生物學樣品中檢測幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori)，或幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori)對克拉霉素的應答的檢測，或幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori)和其對克拉霉素的應答的檢測的用途。

17.權利要求12～14中任一項的方法待應用于在生物學樣品中檢測幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori)，或幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori)對克拉霉素的應答的檢測，或幽門螺桿菌(Helicobacter?pylori)和其對克拉霉素的應答的檢測的用途。