[發(fā)明專利]咸味調(diào)節(jié)物質(zhì)的篩選方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201080045012.6
• 申請日: 2010-09-29
• 公開（公告）號: CN102575279A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 石渡裕;開裕子;前川譽實;江藤讓
• 申請（專利權(quán)）人: 味之素株式會社
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02;C12N15/09
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 吳娟;郭文潔

1.咸味調(diào)節(jié)物質(zhì)的篩選方法，該方法包括下述步驟：使受檢物質(zhì)與表達Kv3.2蛋白的細胞接觸，并將所觀察到的上述細胞內(nèi)的陽離子流入量和未使上述受檢物質(zhì)與上述細胞接觸時所觀察到的上述細胞內(nèi)的陽離子流入量進行比較。

2.權(quán)利要求1所述的方法，其中，通過在鈉離子存在下測定上述細胞的細胞膜電流，來測定上述陽離子的流入量。

3.權(quán)利要求1所述的方法，其中，通過在鈉離子非存在下測定上述細胞的細胞膜電流，來測定上述陽離子的流入量。

4.權(quán)利要求1或2所述的方法，其中，咸味調(diào)節(jié)物質(zhì)為咸味增強物質(zhì)或咸味抑制物質(zhì)。

5.權(quán)利要求1或3所述的方法，其中，咸味調(diào)節(jié)物質(zhì)為咸味替代物質(zhì)。

6.權(quán)利要求1～5中任一項所述的方法，其中，Kv3.2蛋白具有SEQ?ID?NO：2、SEQ?ID?NO：4、SEQ?ID?NO：6、SEQ?ID?NO：8、SEQ?ID?NO：10、SEQ?ID?NO：12、SEQ?ID?NO：14、SEQ?ID?NO：16、SEQ?ID?NO：18、SEQ?ID?NO：40、SEQ?ID?NO：47、SEQ?ID?NO：49、SEQ?ID?NO：51或SEQ?ID?NO：53的氨基酸序列。

7.權(quán)利要求1～5中任一項所述的方法，其中，Kv3.2蛋白與SEQ?ID?NO：2、SEQ?ID?NO：4、SEQ?ID?NO：6、SEQ?ID?NO：8、SEQ?ID?NO：10、SEQ?ID?NO：12、SEQ?ID?NO：14、SEQ?ID?NO：16、SEQ?ID?NO：18、SEQ?ID?NO：40、SEQ?ID?NO：47、SEQ?ID?NO：49、SEQ?ID?NO：51或SEQ?ID?NO：53的序列顯示至少78％以上的序列同一性，并且能夠構(gòu)成活性隨著細胞外鈉離子濃度變化而變化的陽離子通道。

8.權(quán)利要求1～5中任一項所述的方法，其中，Kv3.2蛋白具有包含1個或多個氨基酸殘基的取代、缺失、插入和/或添加的SEQ?ID?NO：2、SEQ?ID?NO：4、SEQ?ID?NO：6、SEQ?ID?NO：8、SEQ?ID?NO：10、SEQ?ID?NO：12、SEQ?ID?NO：14、SEQ?ID?NO：16、SEQ?ID?NO：18、SEQ?ID?NO：40、SEQ?ID?NO：47、SEQ?ID?NO：49、SEQ?ID?NO：51或SEQ?ID?NO：53的氨基酸序列，并且能夠構(gòu)成活性隨著細胞外鈉離子濃度變化而變化的陽離子通道。

9.權(quán)利要求1～5中任一項所述的方法，其中Kv3.2蛋白由下述(a)或(b)所示的DNA編碼：

(a)DNA，其具有SEQ?ID?NO：1、SEQ?ID?NO：3、SEQ?ID?NO：5、SEQ?ID?NO：7、SEQ?ID?NO：9、SEQ?ID?NO：11、SEQ?ID?NO：13、SEQ?ID?NO：15、SEQ?ID?NO：17、SEQ?ID?NO：39、SEQ?ID?NO：46、SEQ?ID?NO：48、SEQ?ID?NO：50或SEQ?ID?NO：52的核苷酸序列；

(b)DNA，其能夠在嚴格的條件下和與SEQ?ID?NO：1、SEQ?ID?NO：3、SEQ?ID?NO：5、SEQ?ID?NO：7、SEQ?ID?NO：9、SEQ?ID?NO：11、SEQ?ID?NO：13、SEQ?ID?NO：15、SEQ?ID?NO：17、SEQ?ID?NO：39、SEQ?ID?NO：46、SEQ?ID?NO：48、SEQ?ID?NO：50或SEQ?ID?NO：52的核苷酸序列互補的核苷酸序列、或可由上述核苷酸序列制備的探針進行雜交，并且編碼能夠構(gòu)成活性隨著細胞外鈉離子濃度變化而變化的陽離子通道的蛋白。

10.權(quán)利要求1～5中任一項所述的方法，其中，Kv3.2蛋白為：選自來自人、小鼠、大鼠、爪蟾屬的蛙、狗、馬、黑猩猩、恒河猴、雞、負鼠、豬或牛的Kv3.2蛋白同系物，以及它們的突變體、它們的片段和它們的嵌合蛋白。

11.權(quán)利要求1～10中任一項所述的方法，其中，上述細胞為以可表達的形態(tài)導(dǎo)入有編碼Kv3.2蛋白的多核苷酸的卵母細胞。