[發明專利]對循環腫瘤細胞進行分類的方法

在審

• 申請號: 201080039127.4
• 申請日: 2010-09-02
• 公開（公告）號: CN102482703A
• 公開（公告）日: 2012-05-30
• 發明（設計）人: P·昆
• 申請（專利權）人: 斯克里普斯研究所
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02;A01N63/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 趙蓉民;陸惠中

1.對來自對象的循環腫瘤細胞(CTC)進行分類的方法，包括：

a)提供來自對象的第一和第二樣品；

b)通過去除或改變物理結合于CTC表面的蛋白質、糖類、細胞或其組合來暴露所述第一樣品的CTC，從而顯露和暴露所述CTC；

c)利用對第一細胞標記特異的試劑分析b)中暴露的CTC；

d)利用對第一或第二細胞標記特異的試劑分析所述第二樣品的CTC；和

e)比較c)和d)的結果以提供來自所述對象的CTC的分類，從而對所述CTC進行分類。

2.權利要求1所述的方法，進一步包括將e)的結果與所述對象之前的分類或已知分類進行比較。

3.權利要求1所述的方法，其中第二樣品的CTC在分析之前未暴露。

4.權利要求1所述的方法，其中(e)所述的比較包括計算所述第一樣品中具有所述第一細胞標記的CTC數量與所述第二樣品中具有所述第一細胞標記的CTC數量的比率。

5.權利要求1所述的方法，其中(e)所述的比較包括計算所述第一樣品中具有所述第一細胞標記的CTC數量與所述第二樣品中具有所述第二細胞標記的CTC數量的比率。

6.權利要求1所述的方法，其中所述第一和第二細胞標記選自：EGFR、HER2、ERCC1、CXCR4、EpCAM、E-鈣粘素、粘蛋白-1、細胞角蛋白、PSA、PSMA、RRM1、雄激素受體、雌激素受體、黃體酮受體、IGF1、cMET、EML4或白細胞相關受體(LAR)。

7.權利要求1所述的方法，其中(c)和(d)所述的試劑是用于檢測所述細胞標記的抗體。

8.權利要求7所述的方法，其中所述抗體被熒光標記。

9.權利要求8所述的方法，其中所述抗體針對EpCAM、細胞角蛋白或其組合。

10.權利要求1所述的方法，其中(b)所述的暴露包括去除全部或部分血漿蛋白、血小板或其組合。

11.權利要求10所述的方法，其中所述血漿蛋白是凝血因子。

12.權利要求11所述的方法1，其中所述凝血因子是纖維蛋白。

13.權利要求1所述的方法，其中(b)所述的暴露包括酶處理、機械處理、電處理、電磁處理、化學處理、或其任意組合。

14.權利要求13所述的方法，其中(b)所述的暴露包括酶處理。

15.權利要求14所述的方法，其中所述酶處理通過纖維蛋白溶解進行。

16.權利要求15所述的方法，其中所述纖維蛋白溶解用纖溶酶進行。

17.權利要求14所述的方法，其中所述酶處理通過與動物毒液或毒素溫育進行。

18.權利要求14所述的方法，其中所述酶處理通過纖溶酶原活化進行。

19.權利要求1所述的方法，其中(b)所述的暴露包括用抗凝結劑或血液稀釋劑處理所述細胞。

20.權利要求1所述的方法，其中所述第一和第二樣品為約200微升。

21.權利要求1所述的方法，進一步包括在分析前富集所述第一或第二樣品。

22.權利要求21所述的方法，其中所述樣品通過免疫磁性富集或通過過濾富集。

23.權利要求1所述的方法，其中(c)或(d)所述的分析包括圖像分析。

24.權利要求23所述的方法，其中所述圖像分析通過顯微鏡或流式細胞計量術進行。

25.權利要求1所述的方法，進一步包括提供所述對象的預后。

26.權利要求1所述的方法，其中所述對象已知患有癌癥。

27.權利要求26所述的方法，其中所述對象正在進行癌癥治療。

28.權利要求27所述的方法，其中所述治療是化學治療。