[發明專利]用于通過過量表達胞外多糖質構化食品的具有修飾的半乳糖激酶表達的乳酸細菌

有效

• 申請號: 201080038979.1
• 申請日: 2010-09-01
• 公開（公告）號: CN102695420A
• 公開（公告）日: 2012-09-26
• 發明（設計）人: 托馬斯·簡森;迪特·埃勒高·克里斯琴森
• 申請（專利權）人: 科·漢森有限公司
• 主分類號: A23C9/12
• 分類號: A23C9/12;A23L1/054;C12N9/12;C12R1/46
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 陳建芳;閻娬斌

1.一種制造乳酸細菌的方法，其包括：

a)提供乳酸細菌菌株(母菌株)；和

b)在所述菌株的GalK基因中引入突變。

2.根據前述權利要求所述的制造乳酸細菌的方法，所述乳酸細菌在發酵奶中比母菌株產生更高的粘度(例如以在37℃下生長12小時后的剪切應力度量)，所述方法包括：

a)提供乳酸細菌菌株(母菌株)；和

b)在所述菌株的GalK基因中引入突變。

3.根據任一前述權利要求所述的制造乳酸細菌的方法，所述乳酸細菌在發酵奶中產生大于約70Pa的粘度(例如以在37℃下生長12小時后的剪切應力度量)，所述方法包括：

a)提供乳酸細菌菌株(母菌株)；和

b)在所述菌株的GalK基因中引入突變。

4.根據任一前述權利要求所述的方法，其包括一個或多個選自以下組的其它步驟：

c1)篩選產生質構的突變株，例如產生比母菌株更高的質構性或增加奶底物的粘度的菌株；和

c2)篩選具有Gal+表型、例如與母菌株相比具有提高的半乳糖降解/發酵活性的突變株。

5.根據任一前述權利要求所述的方法，其中所述突變被引入所述基因的啟動子區域中。

6.根據任一前述權利要求所述的方法，其中所述突變被引入所述基因的-10區域(Pribnow盒)中。

7.根據前述權利要求所述的方法，其中所述突變導致野生型-10區域(TACGAT，SEQ?ID?NO：1)中的C和G之一或兩者被獨立選自由A和T組成的組的核苷酸替換。

8.根據前述權利要求所述的方法，其中所述突變導致野生型-10區域(TACGAT，SEQ?ID?NO：1)中的C被獨立選自由A和T組成的組的核苷酸替換。

9.根據前述權利要求所述的方法，其中所述突變導致野生型-10區域(TACGAT，SEQ?ID?NO：1)中的C被T替換。

10.根據任一前述權利要求所述的方法，其中所述突變產生具有核苷酸序列TATGAT(SEQ?ID?NO：2)、TATTAT(SEQ?ID?NO：3)或TACTAT(SEQ?ID?NO：4)的-10區域。

11.根據任一前述權利要求所述的方法，其中所述突變使用基因工程技術引入。

12.根據任一前述權利要求所述的方法，其中所述突變使用誘變技術，例如通過輻射或用化學劑處理而引入，任選地隨后對GalK基因進行分析以檢驗GalK基因中的突變。

13.根據任一前述權利要求所述的方法，其中所述細菌屬于嗜熱鏈球菌(Streptococcus?thermophilus)種。

14.一種乳酸細菌，其通過任一前述權利要求的方法獲得。

15.一種乳酸細菌，其在發酵奶中產生大于約70Pa(例如大于73Pa)的粘度，例如以在37℃下生長12小時后的剪切應力度量。

16.一種乳酸細菌，其在GalK基因的-10區域中攜帶突變(與野生型-10區域(TACGAT，SEQ?ID?NO：1)相比)，其中所述突變產生具有核苷酸序列TATGAT(SEQ?ID?NO：2)、TATTAT(SEQ?ID?NO：3)或TACTAT(SEQ?ID?NO：4)的-10區域。

17.一種乳酸細菌，其在GalK基因的-10區域中攜帶突變，所述突變導致野生型-10區域(TACGAT，SEQ?ID?NO：1)中的C被獨立選自由A和T組成的組的核苷酸替換。

18.根據前述權利要求所述的乳酸細菌，其中所述突變導致C被T替換。

19.一種乳酸細菌，其包含SEQ?ID?NO：5或其啟動子區域，該啟動子區域包含-35區域和-10區域。

20.根據任一前述權利要求所述的乳酸細菌，其屬于嗜熱鏈球菌種。