[發明專利]殺腫瘤的、殺菌的、或殺病毒的巨噬細胞的激活

無效

• 申請號: 201080037404.8
• 申請日: 2010-08-23
• 公開（公告）號: CN102596223A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 查爾斯·肯尼薩維奇;羅伯特·希爾維茲
• 申請（專利權）人: 查爾斯·肯尼薩維奇;羅伯特·希爾維茲
• 主分類號: A61K38/17
• 分類號: A61K38/17;A61K47/48;A61K47/30;A61K47/38;C07K14/47;A61P35/00;A61P31/00
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 王兵;俞慧

相關申請的交叉引用

本申請要求2009年8月22日提交的美國臨時申請61/236,088的權利，此處通過引用以整體形式并入本申請。

技術領域

本發明涉及巨噬細胞的激活和治療癌癥、細菌病原體和病毒病原體的方法。尤其，在活體內或活體外，將維生素D結合蛋白(Gc蛋白質)轉化為Gc-巨噬細胞激活因子(GcMAF)。GcMAF激活巨噬細胞，然后激活的巨噬細胞把癌癥細胞、細菌病原體和/或病毒病原體作為靶標。兩者擇一地，在活體內或活體外，巨噬細胞通過與GcMAF接觸而被激活。可選擇地，通過將病人血液與一種固定在惰性介質上的α-N-乙酰半乳糖胺酶結合配體接觸使α-N-乙酰半乳糖胺酶(nagalase)失活。

背景技術

對傳統的治療模式有抵抗力的轉移的不受控生長，是癌癥死亡的一個主要原因。轉移起因于先前存在于原發性腫瘤中的特異性惡性腫瘤細胞的非隨機擴散。這些轉移在起源上可以是克隆的，且不同轉移能來源于不同祖細胞。此外，與良性非轉移性細胞相比，轉移性細胞表現出自發突變速率增加。該數據為多發性轉移對同種治療模式顯示出不同敏感性的臨床觀察提供了解釋。這些發現暗示播散性轉移的成功治療必須設法克服腫瘤異質性的問題和抵抗力的發展。

適當地激活的巨噬細胞能夠達到這些苛刻的標準。巨噬細胞激活后，通過與包含免疫調制劑的磷脂囊泡(脂質體)相互作用而變得具有殺腫瘤的性能。殺腫瘤的巨噬細胞可在活體內和活體外識別并破壞腫瘤細胞，而讓非腫瘤細胞免受傷害。盡管巨噬細胞辨別致腫瘤細胞和正常細胞的確切機制是未知的，但是它不依賴于腫瘤細胞的特性，如免疫原性、轉移潛能和對細胞毒素藥物的敏感性。而且，巨噬細胞破壞腫瘤細胞顯然與腫瘤細胞抵抗力的發展不相關。

此外，激活的巨噬細胞對形成涉及細菌和病毒入侵的免疫反應是必不可少的。由于在三種反應(殺腫瘤，殺細菌，殺病毒)中激活的機制是相同的，因此巨噬細胞的激活在橫跨抗腫瘤、細菌和病毒挑戰的宿主免疫反應中進行應用。

維生素D結合蛋白，也稱為DBP或Gc蛋白質，是動物內一種進化中保守的糖蛋白(Cooke和Haddad，Endocrine?Rev.10：2941989)。動物DBP與人DBP在血清學上交叉反應(Ogata等等，Comp.Bioch.Physiol.90B：193，1988)。在一些物種中，動物DBP是一種遺傳上多態的血漿蛋白質，其相對分子質量約52,000。在動物中，它通常構成約0.5％的血漿蛋白質。血漿濃度通常為約260μg/ml。人DBP(又稱為“組特異性成分”(group?specific?component)或“Gc蛋白質”)的多態性可以通過凝膠電泳分析確認，該分析揭示兩種主要的表型：Gc1和Gc2(Hirschfeld等等，Nature?185：931，1960)。Gc1和Gc2基因的全部核苷酸編碼序列和預測的氨基酸序列已被報道(Cooke等等，J.Clin.Invest.76：2420，1985；Yang等等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA?82：7994，1985)。Gc1被進一步分成Gc1f和Gc1s亞型，兩種亞型電泳遷移形成兩條條帶，“快”和“慢”(Svasti等等，Biochem.18：1611，1979)。

巨噬細胞的激活由隨之增強的吞噬活性表征，其是在宿主抵抗癌癥以及細菌和病毒病原體的免疫防御機制的第一個主要步驟。巨噬細胞激活需要B和T淋巴細胞作用，其逐步改變DBP/Gc蛋白質，以得到GcMAF。圖1中的反應“a”顯示Gc蛋白質如何與B-細胞表達的β-半乳糖苷酶反應以形成一種Gc蛋白質中間產物，該產物然后與T-細胞表達的唾液酸酶反應形成GcMAF。

Nagalase(α-N-乙酰半乳糖胺酶)阻斷圖1中反應(b)所示的Gc蛋白質到Gc-MAF的轉化。Nagalase與Gc蛋白質反應生成一種去糖基的Gc蛋白質產物，該產物阻止GcMAF的形成和隨之發生的巨噬細胞的激活。Nagalase由多種癌細胞和一些細菌和病毒病原體產生，且是一種癌癥細胞和其它病原體借以逃避宿主免疫系統的機制。血液中Nagalase測量被用作一種診斷工具，比如，例如在癌癥診斷和治療期間診斷癌癥和監測腫瘤負荷。

GcMAF應當與T-細胞淋巴因子巨噬細胞激活因子(也稱為γ-干擾素)進行區分，T細胞淋巴因子巨噬細胞激活因子由產淋巴因子T細胞少量產生，或在藥品級水平由基因工程獲得。