[發明專利]聚乙二醇化的L-天冬酰胺酶

有效

• 申請號: 201080030392.6
• 申請日: 2010-07-06
• 公開（公告）號: CN102573917A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: T·阿布里巴
• 申請（專利權）人: 阿利茲第二藥物公司
• 主分類號: A61K47/48
• 分類號: A61K47/48;C12N9/82;A61P35/02
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 李程達

發明背景

發明領域

本發明涉及具有實質性的L-天冬酰胺氨基水解酶活性的蛋白質與聚乙二醇的綴合物，特別是其中所述聚乙二醇具有低于或等于約5000Da的分子量，特別涉及其中所述蛋白質是來自歐文氏菌(Erwinia)的L-天冬酰胺酶的綴合物，以及其在治療中的用途。

背景技術

具有L-天冬酰胺氨基水解酶活性的蛋白(通常被稱作L-天冬酰胺酶)已經多年被成功地用于治療兒童中的急性淋巴細胞白血病(ALL)。ALL是最常見的兒童惡性腫瘤(Avramis?and?Panosyan，Clin.Pharmacokinet.(2005)44：367-393)。

L-天冬酰胺酶還被用于治療何杰金氏病，急性骨髓白血病，急性骨髓單核細胞白血病，慢性淋巴細胞白血病，淋巴肉瘤，網狀細胞肉瘤和黑素肉瘤(Kotzia?and?Labrou，J.Biotechnol.127(2007)657-669)。L-天冬酰胺酶的抗腫瘤活性被相信是由于某些惡性細胞不能合成L-天冬酰胺或降低了合成L-天冬酰胺的能力(Kotzia?and?Labrou，J.Biotechnol.127(2007)657-669)。這些惡性細胞依賴于L-天冬酰胺的細胞外供給。然而，L-天冬酰胺酶催化L-天冬酰胺水解為天冬胺酸和氨，從而耗盡循環的L-天冬酰胺庫并殺死腫瘤細胞，所述腫瘤細胞在沒有L-天冬酰胺時不能進行蛋白質合成(Kotzia?and?Labrou，J.Biotechnol.127(2007)657-669)。

來自大腸桿菌的L-天冬酰胺酶是用于ALL治療的第一種酶藥物并且在美國已作為上市，或者在歐洲作為和L-天冬酰胺酶上市。也從其它的微生物中分離了L-天冬酰胺酶，例如，來自菊歐文氏菌(Erwinia?chrysanthemi)的L-天冬酰胺酶蛋白，被命名為克立他酶(crisantaspase)，其作為上市(Wriston?Jr.，J.C.(1985)″L-asparaGlnase″Meth.Enzymol.113，608-618；Goward，C.R.等人.(1992)″Rapid?large?scale?preparation?of?recombinant?Erwinia?chrysanthemi?L-asparaGlnase″，Bioseparation?2，335-341)。還鑒別了來自其它歐文氏菌菌種的L-天冬酰胺酶，包括例如菊歐文氏菌3937(Genbank登錄號AAS67028)，菊歐文氏菌NCPPB?1125(Genbank登錄號CAA31239)，胡蘿卜軟腐歐文氏菌(Erwinia?carotovora)(Genbank登錄號AAP92666)和胡蘿卜軟腐歐文氏菌馬鈴薯黑脛亞種(Erwinia?carotovora?subsp.Astroseptica)(Genbank登錄號AAS67027)。這些菊歐文氏菌L-天冬酰胺酶彼此間具有大約91％-98％的氨基酸序列同一性，而胡蘿卜軟腐歐文氏菌L-天冬酰胺酶與菊歐文氏菌L-天冬酰胺酶具有大約75％-77％的氨基酸序列同一性(Kotzia?and?Labrou，J.Biotechnol.127(2007)657-669)。

細菌來源的L-天冬酰胺酶具有高免疫原和抗原潛力并且經常引起不良反應，所述不良反應的范圍從輕度過敏反應到敏化患者中的過敏性休克(Wang，B.等人.(2003)″Evaluation?of?immunologic?cross?reaction?of?anti-asparaGlnase?antibodies?in?acute?lymphoblastic?leukemia(ALL?and?lymphoma?patients)，Leukemia?17，1583-1588)。大腸桿菌L-天冬酰胺酶是特別有免疫原性的，據報道在i.v.或i.m.施用之后，存在抗大腸桿菌L-天冬酰胺酶的抗天冬酰胺酶抗體：在成年人中高達78％；在兒童中為70％(Wang，B.等人.(2003)Leukemia?17，1583-1588)。