[發明專利]用于抑制單或多靶基因的多順反子shRNA表達盒

無效

• 申請號: 201080028461.X
• 申請日: 2010-06-04
• 公開（公告）號: CN102575248A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 薛大寓
• 申請（專利權）人: 薛大寓
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12N15/63
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司 11204
• 代理人: 王達佐;洪欣

1.多順反子shRNA表達盒，其包含啟動子和可操作地連接到所述啟動子的兩個或更多個編碼對靶基因特異的shRNA(小發夾RNA)的多聚核苷酸。

2.根據權利要求1所述的多順反子shRNA表達盒，其中所述兩個或更多個多聚核苷酸是編碼對一個靶基因的單一位點或不同位點特異的shRNA的多聚核苷酸。

3.根據權利要求1所述的多順反子shRNA表達盒，其中所述兩個或更多個多聚核苷酸是編碼對多靶基因中每一靶基因的單一位點或不同位點特異的shRNA的多聚核苷酸。

4.根據權利要求1所述的多順反子shRNA表達盒，其中所述兩個或更多個多聚核苷酸具有相同的序列。

5.根據權利要求1所述的多順反子shRNA表達盒，其中所述啟動子選自U6啟動子、H1啟動子和CMV啟動子。

6.根據權利要求1所述的多順反子shRNA表達盒，其中所述靶基因選自XIAP、Akt、Bcl-2和Fas。

7.根據權利要求1所述的多順反子shRNA表達盒，其中所述shRNA源自SEQ?ID?NO.1的microRNA?mir-30。

8.包含權利要求1至7中任一項所述的多順反子shRNA表達盒的表達載體。

9.根據權利要求8所述的表達載體，其中所述表達載體是質粒。

10.根據權利要求8所述的表達載體，其中所述表達載體選自慢病毒、逆轉錄病毒、腺病毒、腺相關病毒、皰疹病毒和禽痘病毒。

11.用權利要求8所述的表達載體轉導的細胞。

12.權利要求8所述的載體和用于將所述載體轉導至細胞的轉運體的復合物，所述轉運體選自PEG(聚乙二醇)、PEI(聚乙烯亞胺)、殼聚糖、PEG-殼聚糖、DEAE-葡聚糖、核蛋白、脂類和肽。

13.在細胞中抑制各種靶基因的方法，其包括：

(a)制備權利要求8所述的表達載體；和

(b)將所制備的載體導入所述細胞。

14.用于抑制靶基因的組合物，其包含權利要求8所述的表達載體。