[發明專利]制造異源多聚體分子的方法

有效

• 申請號: 201080026552.X
• 申請日: 2010-04-27
• 公開（公告）號: CN102459346B
• 公開（公告）日: 2016-10-26
• 發明（設計）人: 奧斯丁·L·格尼;阿龍·肯·薩拓
• 申請（專利權）人: 昂考梅德藥品有限公司
• 主分類號: C07K16/46
• 分類號: C07K16/46;C07K16/28;C07K16/22;C07K16/18;C12N15/13;C12N1/21;C12N1/19;C12N5/10;C12P21/02;C12P21/08;A61K39/395;A61P35/00
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司 11127
• 代理人: 丁香蘭;龐東成

1.一種制備包含兩條多肽的異源多聚體多肽的方法，所述兩條多肽都含有人免疫球蛋白CH3結構域，所述方法包括將所述兩條多肽中的一條的CH3結構域內的至少一個氨基酸取代為另一氨基酸，從而促進異源多聚體的形成，所述至少一個氨基酸位于與選自由人IgG2的236位、245位、249位、278位、286位和288位組成的組的位置對應的位置。

2.一種制備包含兩條多肽的異源多聚體多肽的方法，所述兩條多肽都含有人免疫球蛋白CH3結構域，所述方法包括將所述兩條多肽中的每一條的CH3結構域中的至少一個帶電荷的氨基酸殘基取代為帶相反電荷的氨基酸。

3.如權利要求2所述的方法，其中，取代后的氨基酸對在所述異源多聚體多肽中形成離子對。

4.一種制備包含兩條多肽的異源多聚體多肽的方法，所述兩條多肽都含有人免疫球蛋白CH3結構域，所述方法包括將所述兩條多肽中的一條的CH3結構域中的至少一個親水氨基酸殘基取代為另一氨基酸。

5.如權利要求4所述的方法，其中，所述親水氨基酸殘基被疏水殘基取代。

6.如權利要求4所述的方法，其中，具有羥基側鏈的氨基酸被不具有羥基側鏈的氨基酸取代。

7.如權利要求1或2所述的方法，其中，所述方法還包括：將所述兩條多肽中的一條的CH3結構域中的至少一個親水氨基酸殘基取代為另一氨基酸所述兩條多肽的界面處所述兩條多肽中的一條取代為另一氨基酸。

8.如權利要求1～7中任一項所述的方法，其中，取代后的氨基酸在所述兩條多肽的界面處與另一氨基酸相互作用。

9.如權利要求1～8中任一項所述的方法，其中，被取代的氨基酸列于表1中，或者是位于與表1中列出的那些位置對應的位置上的氨基酸。

10.如權利要求1～9中任一項所述的方法，其中，所述兩條多肽的所述人免疫球蛋白CH3結構域選自由IgG、IgA和IgD的CH3結構域組成的組。

11.如權利要求10所述的方法，其中，所述免疫球蛋白CH3結構域是IgG2CH3結構域。

12.如權利要求1～11中任一項所述的方法，其中，含有CH3結構域的第一條多肽包含與第一免疫球蛋白輕鏈多肽特異性地結合的第一免疫球蛋白重鏈多肽，并且含有CH3結構域的第二條多肽包含與第二免疫球蛋白輕鏈多肽特異性地結合的第二免疫球蛋白重鏈多肽。

13.如權利要求12所述的方法，其中，所述第一免疫球蛋白輕鏈多肽和所述第二免疫球蛋白輕鏈多肽在氨基酸序列上是同一的。

14.如權利要求12所述的方法，其中，所述免疫球蛋白輕鏈多肽與所述免疫球蛋白重鏈多肽連接。

15.如權利要求1～14中任一項所述的方法，所述方法包括對一個CH3結構域中的位于與人IgG2的249位和288位對應的位置上的氨基酸進行取代。

16.如權利要求15所述的方法，其中，位于249位和288位上的氨基酸被谷氨酸置換。

17.如權利要求15所述的方法，其中，位于249位和288位上的氨基酸被天冬氨酸置換。

18.如權利要求1～14中任一項所述的方法，所述方法包括對一個CH3結構域中的位于與人IgG2的249位、286位和288位對應的位置上的氨基酸進行取代。

19.如權利要求18所述的方法，其中，位于249位和288位上的氨基酸被谷氨酸置換，并且位于286位上的氨基酸被苯丙氨酸置換。

20.如權利要求13～19中任一項所述的方法，所述方法還包括對第二個CH3結構域中的位于與人IgG2的236位和278位對應的位置上的氨基酸進行取代。

21.如權利要求20所述的方法，其中，位于236位上的氨基酸被賴氨酸置換，并且位于278位上的氨基酸被賴氨酸置換。

22.如權利要求1～14中任一項所述的方法，所述方法包括對一個CH3結構域中的位于與人IgG2的236位和278位對應的位置上的氨基酸進行取代。