[發(fā)明專利]靶向胸苷酸合酶的RNAi分子及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201080015581.6
• 申請日: 2010-03-29
• 公開（公告）號: CN102369283A
• 公開（公告）日: 2012-03-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 和田洋巳;黃政龍
• 申請（專利權(quán)）人: 德爾塔菲制藥股份有限公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K31/4412;A61K31/513;A61K31/53;A61K31/7088;A61K48/00;A61P35/00;A61P43/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 李波;郭文潔

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及靶向胸苷酸合酶的RNAi分子，包含該RNAi分子的抗腫瘤劑，包含該RNAi分子的加強(qiáng)5-FU抗腫瘤劑的抗腫瘤作用的試劑，和包含該RNAi分子和5-FU抗腫瘤劑（特別是包含替加氟、吉美嘧啶和氧嗪酸鉀的組合藥物）的藥物組合物。

背景技術(shù)

5-FU抗腫瘤劑，例如5-氟尿嘧啶（下文稱為“5-FU”），包含替加氟和尿嘧啶的組合藥物，或包含替加氟、吉美嘧啶和氧嗪酸鉀的組合藥物（以1：0.4：1的摩爾比例包含替加氟、吉美嘧啶和氧嗪酸鉀的組合藥物，下文稱為“S-1”）通常用于治療多種類型的癌癥，包括消化系統(tǒng)癌癥和非小細(xì)胞肺癌。已知涉及DNA合成的胸苷酸合酶（下文稱為“TS”）是5-FU的靶分子。因此迄今為止許多臨床試驗(yàn)已報(bào)導(dǎo)了TS表達(dá)水平和對5-FU抗腫瘤劑的敏感性之間的相關(guān)性。特別地，5-FU抗腫瘤劑對展示相對低的TS表達(dá)水平的癌癥患者的作用顯著，盡管許多展示相對高的TS表達(dá)水平的癌癥患者對5-FU抗腫瘤劑具有抗性(Patrick?G.?Johnston?等人,?Cancer?Res.,?1995;?55:?1407-12;?Kun-Huei?Yeh?等人,?Cancer,?1998;?82:?1626-31)。因此，期待開發(fā)新的加強(qiáng)5-FU抗腫瘤劑的抗腫瘤作用的癌癥治療技術(shù)用于展示相對高的TS表達(dá)水平和對5-FU抗腫瘤劑具有抗性的癌癥患者。

也有報(bào)導(dǎo)TS表達(dá)可被RNA干擾（下文稱為“RNAi”）的使用所抑制，RNAi已被開發(fā)為抑制給定基因的表達(dá)的工具（日本專利公開(Kokai)?No.?2005-253342?A）。因此，已經(jīng)嘗試了通過RNAi抑制TS表達(dá)加強(qiáng)5-FU抗腫瘤劑的抗腫瘤作用，盡管加強(qiáng)抗腫瘤作用的效果還不令人滿意(Kadota?等人,?the?67th?Annual?Meeting?of?the?Japanese?Cancer?Association,?2008,?p.?235,?P-4274)。

發(fā)明概述

本發(fā)明要達(dá)到的目的

本發(fā)明旨在提供可顯著加強(qiáng)5-FU抗腫瘤劑的抗腫瘤作用的新RNAi分子。

達(dá)到目的的手段

在上述情況下，本發(fā)明人進(jìn)行了有關(guān)可顯著加強(qiáng)5-FU抗腫瘤劑的抗腫瘤作用的新RNAi分子的研究。結(jié)果，他們發(fā)現(xiàn)了可以特別顯著的水平抑制TS表達(dá)的新RNAi分子。本發(fā)明人也確認(rèn)了這樣的RNAi分子可顯著抑制TS表達(dá)和因此施加抗腫瘤作用并加強(qiáng)5-FU抗腫瘤劑的抗腫瘤作用（特別是包含替加氟、吉美嘧啶和氧嗪酸鉀的組合藥物）。這導(dǎo)致了本發(fā)明的實(shí)現(xiàn)。

具體地，本發(fā)明如下描述。

[1]能夠通過RNAi作用抑制胸苷酸合酶表達(dá)的RNAi分子，其包含由與反義鏈雜交的由SEQ?ID?NO:?1,?3或5所代表的核苷酸序列組成的有義鏈構(gòu)成的雙鏈RNA結(jié)構(gòu)域，所述反義鏈在嚴(yán)格雜交條件下與所述有義鏈雜交。

[2]根據(jù)[1]的RNAi分子，其包含任意以下有義鏈和反義鏈組合：

由SEQ?ID?NO:?1所代表的核苷酸序列組成的有義鏈和由SEQ?ID?NO:?2所代表的核苷酸序列組成的反義鏈；

由SEQ?ID?NO:?3所代表的核苷酸序列組成的有義鏈和由SEQ?ID?NO:?4所代表的核苷酸序列組成的反義鏈；或

由SEQ?ID?NO:?5所代表的核苷酸序列組成的有義鏈和由SEQ?ID?NO:?6所代表的核苷酸序列組成的反義鏈。

[3]根據(jù)[1]或[2]的RNAi分子，其中所述有義鏈通過接頭區(qū)與反義鏈連接。

[4]根據(jù)[3]的RNAi分子，其由SEQ?ID?NO:?8所代表的核苷酸序列組成。

[5]包含根據(jù)[3]或[4]的RNAi分子的模板DNA并表達(dá)RNAi分子的載體。

[6]包含根據(jù)[1]至[4]中任一項(xiàng)的RNAi分子和/或根據(jù)[5]的載體的抗腫瘤劑。

[7]用于治療和/或預(yù)防癌癥的藥物組合物，其包含與5-FU抗腫瘤劑組合的根據(jù)[1]至[4]中任一項(xiàng)的RNAi分子和/或根據(jù)[5]的載體。

[8]根據(jù)[7]的藥物組合物，其中5-FU抗腫瘤劑是包含替加氟的組合藥物。

[9]根據(jù)[8]的藥物組合物，其中5-FU抗腫瘤劑是包含替加氟、吉美嘧啶和氧嗪酸鉀的組合藥物。

[10]根據(jù)[9]的藥物組合物，其以1：0.4：1的摩爾比例包含替加氟、吉美嘧啶和氧嗪酸鉀。