[發明專利]用于創傷調理和皮膚護理的新型蛋白酶

有效

• 申請號: 201080015247.0
• 申請日: 2010-03-03
• 公開（公告）號: CN102388135A
• 公開（公告）日: 2012-03-21
• 發明（設計）人: F·尼豪斯;J·埃克;R·舒爾茨;M·克羅恩
• 申請（專利權）人: B.R.A.I.N.生物技術研究和信息網絡公司
• 主分類號: C12N9/64
• 分類號: C12N9/64;C07K16/40;A61K38/43;C12N15/62;C12N5/10
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司 11127
• 代理人: 丁香蘭;龐東成

1.一種核酸分子，所述核酸分子

(i)編碼具有纖維蛋白和酪蛋白切割能力的絲氨酸蛋白酶，所述核酸分子為：

(a)編碼包含氨基酸序列SEQ?ID?NO：4或由氨基酸序列SEQ?ID?NO：4組成的絲氨酸蛋白酶的核酸分子；

(b)包含核苷酸序列SEQ?ID?NO：3或由核苷酸序列SEQ?ID?NO：3組成的核酸分子；

(c)編碼氨基酸序列與(a)中所述的氨基酸序列具有至少80％同一性、優選至少85％同一性、更優選至少90％同一性且最優選至少95％同一性的絲氨酸蛋白酶的核酸分子；

(d)由與(b)中所述的核苷酸序列具有至少80％同一性、優選至少85％同一性、更優選至少90％同一性且最優選至少95％同一性的核苷酸序列組成或包含該核苷酸序列的核酸分子；

(e)與(d)所述的核酸分子簡并的核酸分子；或

(f)與(a)～(d)中任一項的核酸分子對應的其中T被U置換的核酸分子；

(ii)編碼(i)中所述的絲氨酸蛋白酶的片段，所述片段與(i)中所述的絲氨酸蛋白酶活性相同；

(iii)編碼(i)中所述的絲氨酸蛋白酶的前肽，所述前肽在治療創傷前即刻或在治療創傷過程中被切割為其活性形式，其中，所述前肽由選自下述核酸分子(a)～(f)的核酸分子編碼：

(a)編碼包含氨基酸序列SEQ?ID?NO：6或由氨基酸序列SEQ?ID?NO：6組成的絲氨酸蛋白酶前肽的核酸分子；

(b)包含核苷酸序列SEQ?ID?NO：5或由核苷酸序列SEQ?ID?NO：5組成的核酸分子；

(c)編碼氨基酸序列與(a)中所述的氨基酸序列具有至少80％同一性、優選至少85％同一性、更優選至少90％同一性且最優選至少95％同一性的絲氨酸蛋白酶前肽的核酸分子；

(d)由與(b)中所述的核苷酸序列具有至少80％同一性、優選至少85％同一性、更優選至少90％同一性且最優選至少95％同一性的核苷酸序列組成或包含所述核苷酸序列的核酸分子；

(e)與(d)所述的核酸分子簡并的核酸分子；或

(f)與(a)～(d)中任一項的核酸分子對應的其中T被U置換的核酸分子；或者

(iv)編碼(i)中所述的絲氨酸蛋白酶的前肽原，其中，所述前肽原由選自下述核酸分子(a)～(f)的核酸分子編碼：

(a)編碼包含氨基酸序列SEQ?ID?NO：2或由氨基酸序列SEQ?ID?NO：2組成的絲氨酸蛋白酶前肽原的核酸分子；

(b)包含核苷酸序列SEQ?ID?NO：1或由核苷酸序列SEQ?ID?NO：1組成的核酸分子；

(c)編碼氨基酸序列與(a)中所述的氨基酸序列具有至少80％同一性、優選至少85％同一性、更優選至少90％同一性且最優選至少95％同一性的絲氨酸蛋白酶前肽原的核酸分子；

(d)由與(b)中所述的核苷酸序列具有至少80％同一性、優選至少85％同一性、更優選至少90％同一性且最優選至少95％同一性的核苷酸序列組成或包含所述核苷酸序列的核酸分子；

(e)與(d)所述的核酸分子簡并的核酸分子；或

(f)與(a)～(d)中任一項的核酸分子對應的其中T被U置換的核酸分子。

2.一種載體，所述載體編碼權利要求1的核酸分子。

3.一種宿主細胞，所述宿主細胞轉化、轉導或轉染有權利要求2的載體。

4.一種制備絲氨酸蛋白酶及其片段、前肽或前肽原的方法，所述方法包括培養權利要求3的宿主細胞并分離出所產生的所述絲氨酸蛋白酶、所述片段、所述前肽或所述前肽原。

5.一種由權利要求1的核酸分子編碼或通過權利要求4的方法制備的絲氨酸蛋白酶、片段、前肽或前肽原。

6.一種融合蛋白，所述融合蛋白包含權利要求5的絲氨酸蛋白酶、片段、前肽或前肽原。

7.一種組合物，所述組合物包含：權利要求1的核酸，權利要求2的載體，權利要求3的宿主細胞，權利要求5的絲氨酸蛋白酶、片段、前肽或前肽原，或權利要求6的融合蛋白，或它們的組合。

8.如權利要求7所述的組合物，所述組合物是化妝品組合物。

9.如權利要求7所述的組合物，所述組合物是藥物組合物。