[發(fā)明專利]用于檢測(cè)和表征產(chǎn)毒性艱難梭菌菌株的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201080014449.3
• 申請(qǐng)日: 2010-03-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102378817A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-03-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: P.T.C.范登博加爾德;A.E.維塞爾
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 皇家飛利浦電子股份有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68
• 代理公司: 中國(guó)專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 徐厚才;劉鵬

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物和化學(xué)領(lǐng)域。具體地，本發(fā)明屬于分子生物學(xué)領(lǐng)域。更具體地，本發(fā)明屬于核酸的檢測(cè)和實(shí)時(shí)PCR的領(lǐng)域。最具體地，本發(fā)明涉及產(chǎn)毒性艱難梭菌（Clostridium?difficile）菌株的檢測(cè)和表征。

發(fā)明背景

艱難梭菌是梭菌屬的革蘭陽(yáng)性細(xì)菌。梭菌是厭氧芽孢桿菌。艱難梭菌是抗生素相關(guān)性腹瀉(AAD)的最嚴(yán)重原因并且可導(dǎo)致假膜性結(jié)腸炎、嚴(yán)重結(jié)腸感染，通常因抗生素對(duì)正常腸道菌群的根除引起。天然定居在體內(nèi)的艱難梭菌變得生長(zhǎng)過(guò)度：生長(zhǎng)過(guò)度是有害的，因?yàn)榧?xì)菌釋放可引發(fā)胃氣脹、便秘和腹痛腹瀉（diarrhea?with?abdominal?pain）的毒素，所述癥狀可變得嚴(yán)重。潛伏癥狀通常模擬某些流感樣癥狀。中斷病因的抗生素治療（causative?antibiotic?treatment）通常是有療效的。

艱難梭菌感染的嚴(yán)重性可從無(wú)癥狀變化至嚴(yán)重和威脅生命，特別地是在老年人中。人最常在醫(yī)院、醫(yī)護(hù)療養(yǎng)所或公共機(jī)構(gòu)獲得感染，雖然社區(qū)、門(mén)診發(fā)生的艱難梭菌感染日益增加。艱難梭菌獲得速率據(jù)估計(jì)在具有長(zhǎng)達(dá)2周的住院期的患者中為13%，在具有4周以上的住院期的患者中為50%。艱難梭菌結(jié)腸炎的頻率和嚴(yán)重度仍然很高并且似乎與增加的死亡率相關(guān)。早期干預(yù)和侵入性管理是恢復(fù)的關(guān)鍵因素。

在2005?(Dial?S,?Delaney?J,?Barkun?A,?Suissa?S?(2005).?Use?of?gastric?acid-suppressive?agents?and?the?risk?of?community-acquired?Clostridium?difficile-associated?disease.?JAMA?294?(23):?2989–95.?doi:10.1001/jama.294.23.2989)中報(bào)導(dǎo)了據(jù)認(rèn)為在北美引發(fā)地理上分散的暴發(fā)的抗氟喹諾酮抗生素例如鹽酸環(huán)丙沙星制劑（Cipro）(環(huán)丙沙星)和左氧氟沙星制劑（Levaquin）(左氧氟沙星)的艱難梭菌的新型高毒性菌株的出現(xiàn)。

在2003年6月4日，在加拿大的Montreal,?Quebec和Calgary,?Alberta報(bào)導(dǎo)了該細(xì)菌的高毒株的2次暴發(fā)。對(duì)于2003年中和2004年的前幾個(gè)月內(nèi)的約1,400病例，來(lái)源使死亡數(shù)處于低至36與高至89之間。艱難梭菌感染在2004年后期繼續(xù)成為Quebec醫(yī)療保障體系的問(wèn)題。截至2005年3月，其已傳播至?Toronto,?Ontario區(qū)域,?使10人住院。

相似的暴發(fā)在2003與2005年之間于聯(lián)合王國(guó)的Stoke?Mandeville醫(yī)院發(fā)生。

已有人提議加拿大和英國(guó)的暴發(fā)都與該細(xì)菌的似乎更毒的株NAP1/BI/027?相關(guān)。該菌株，也稱為Quebec菌株，也牽涉在兩個(gè)荷蘭醫(yī)院(Harderwijk和Amersfoort,?兩個(gè)都在2005年)暴發(fā)的流行病。解釋027的增強(qiáng)的毒力的理論是其為毒素A和B的超級(jí)生產(chǎn)者（hyperproducer）以及某些抗生素可能實(shí)際上刺激細(xì)菌過(guò)量生產(chǎn)。

當(dāng)分析具有芽孢（spore）的患者的群體時(shí)，無(wú)癥狀的許多患者將該生物傳遞給免疫受損從而對(duì)不斷增加的腹瀉率和不良結(jié)果易感的個(gè)體。似乎值得注意的是上述群代表了對(duì)試圖通過(guò)結(jié)合信息技術(shù)與臨床監(jiān)督來(lái)理解疾病如何傳播的流行病學(xué)家的挑戰(zhàn)。

2006年10月1日，根據(jù)國(guó)家衛(wèi)生局調(diào)查，艱難梭菌據(jù)認(rèn)為在8個(gè)月中在Leicester,?England的醫(yī)院殺死至少49人。

2006年10月27日，在Quebec,?Canada，該細(xì)菌促成9例死亡。

2007年2月27日，在Mississauga,?Ontario的Trillium醫(yī)療中心鑒定了新的暴發(fā)，其中14人被診斷為具有該細(xì)菌。該細(xì)菌與Quebec的細(xì)菌是相同的菌株。官方未能確定艱難梭菌是否是在先前的2個(gè)月中造成4個(gè)患者死亡的原因。