[發(fā)明專利]基于siRNA的細(xì)胞特異性有效的分子和用于制備其的應(yīng)用試劑盒及其用途

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201080011796.0
• 申請日: 2010-03-12
• 公開（公告）號: CN102348799A
• 公開（公告）日: 2012-02-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: T·珀爾曼;D·伊姆霍夫;S·克恩
• 申請（專利權(quán)）人: 耶拿市弗里德里希·席勒大學(xué)
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12N15/113
• 代理公司: 永新專利商標(biāo)代理有限公司 72002
• 代理人: 林曉紅

1.基于siRNA的細(xì)胞特異性有效分子，其用于生物學(xué)無活性地轉(zhuǎn)染入靶細(xì)胞以在其通過結(jié)合至mRNA并形成RISC復(fù)合物而生物學(xué)激活之后抑制靶細(xì)胞中的基因表達(dá)，所述siRNA通過接頭偶聯(lián)至至少一個肽以用于其生物學(xué)失活，并且所述接頭在所述分子的生物學(xué)激活后保留在所述siRNA上，其中所述siRNA(2)通過Cn＝C1、C2、C3、C4、C5或C6的氨基Cn接頭(1)偶聯(lián)至所述至少一個肽(3)。

2.如權(quán)利要求1所述的細(xì)胞特異性有效分子，其中氨基C6接頭被提供為氨基Cn接頭。

3.如權(quán)利要求1所述的細(xì)胞特異性有效分子，其中氨基C5接頭被用作氨基Cn接頭。

4.如權(quán)利要求1所述的細(xì)胞特異性有效分子，其中氨基C4接頭被提供為氨基Cn接頭。

5.如權(quán)利要求1所述的細(xì)胞特異性有效分子，其中氨基C3接頭被用作氨基Cn接頭。

6.如權(quán)利要求1所述的細(xì)胞特異性有效分子，其中將氨基C2接頭提供為氨基Cn接頭。

7.如權(quán)利要求1所述的細(xì)胞特異性有效分子，其中氨基C1接頭被提供為氨基Cn接頭。

8.如權(quán)利要求1所述的細(xì)胞特異性有效分子，其中轉(zhuǎn)染系統(tǒng)共價或非共價地偶聯(lián)至所述生物學(xué)有效分子，并且所述至少一個肽通過所述氨基Cn接頭共價偶聯(lián)以用于將所述分子轉(zhuǎn)染入或轉(zhuǎn)染至靶細(xì)胞，所述轉(zhuǎn)染系統(tǒng)例如載體系統(tǒng)如納米顆粒、配體/抗體/抗原標(biāo)記物或分子，如納米顆粒、聚合物或脂質(zhì)，其用于將可選擇性激活的生物學(xué)有效分子包被以進(jìn)行它們的轉(zhuǎn)染，或者基于脂質(zhì)的方法或TAT蛋白側(cè)翼。

9.用于應(yīng)用或施用如權(quán)利要求1-8中一項或多項所述的細(xì)胞特異性有效分子的應(yīng)用試劑盒，其由以下部分組成：

10.至少一個安瓿(安瓿A)，其含有siRNA，所述siRNA偶聯(lián)至用于失活目的經(jīng)選擇的肽，并且氨基Cn接頭偶聯(lián)至所述siRNA；

-至少另一個安瓿(安瓿B)，其含有轉(zhuǎn)染系統(tǒng)，如納米顆粒或脂質(zhì)；

-用于所述安瓿A和安瓿B的內(nèi)容物的稀釋和反應(yīng)緩沖劑；

-一種或多種探針或者具有套管的注射器和其他所需材料，其用于將混合物從所述安瓿內(nèi)容物注射入含有所述靶細(xì)胞的介質(zhì)，以及

-用于應(yīng)用和施用的說明書。

11.如權(quán)利要求13所述的應(yīng)用試劑盒，其含有至少一種其他物質(zhì)，例如用于所述生物學(xué)有效分子半選擇性偶聯(lián)至靶細(xì)胞的抗體和/或聚乙二醇鏈，用于錨定所述肽和所述生物學(xué)有效分子。

12.用于制備如權(quán)利要求1-8中一項或多項所述的細(xì)胞特異性有效分子的應(yīng)用試劑盒，其至少由以下部分組成：

-一個安瓿(安瓿A)，其含有可以偶聯(lián)至siRNA以用于其失活的一個或多個肽；

-一個安瓿(安瓿B)，具有用于將所述一個或多個肽偶聯(lián)至所述siRNA的反應(yīng)緩沖劑；

-一個安瓿(安瓿C)，其用于在所述肽偶聯(lián)至所述siRNA后修飾所述肽；

-一個安瓿(安瓿D)，具有其他反應(yīng)緩沖劑；

-系統(tǒng)，其用于在所述肽偶聯(lián)至所述siRNA后純化亞產(chǎn)物或終產(chǎn)物；

-一種或多種注射裝置，如探針或者具有套管的注射器，用于將混合物從所述安瓿內(nèi)容物注射，以及其他所需材料，如滲析膜或反應(yīng)容器；以及

-用于應(yīng)用的說明書。