[發明專利]粟酒裂殖酵母的轉化方法、轉化體以及異源蛋白質的制造方法

無效

• 申請號: 201080006331.6
• 申請日: 2010-01-26
• 公開（公告）號: CN102292442A
• 公開（公告）日: 2011-12-21
• 發明（設計）人: 浜祐子;依地熱斯·阿里木江;東田英毅
• 申請（專利權）人: 旭硝子株式會社
• 主分類號: C12N15/09
• 分類號: C12N15/09;C12N1/19;C12P21/00
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 馮雅

1.粟酒裂殖酵母的轉化方法，它是利用具有表達盒和重組位點的載體通過同源重組將所述表達盒整合到粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces?pombe)的染色體中的轉化方法，所述表達盒包含在所述粟酒裂殖酵母內起作用的啟動子、異源蛋白質結構基因以及終止子，所述重組位點與所述粟酒裂殖酵母的染色體進行同源重組，其特征在于，所述重組位點的堿基序列為將實質上具有同一堿基序列的位點作為靶位點且能夠與該靶位點進行同源重組的序列，該位點分別存在于所述粟酒裂殖酵母的多個染色體中的各個不同的染色體和/或以其間夾有一個以上的必需基因的方式存在于同一染色體的多個位置。

2.如權利要求1所述的粟酒裂殖酵母的轉化方法，其特征在于，在粟酒裂殖酵母的染色體中存在5個以上的所述靶位點。

3.如權利要求1或2所述的粟酒裂殖酵母的轉化方法，其特征在于，所述靶位點為轉座子基因Tf2中的堿基序列。

4.粟酒裂殖酵母的轉化方法，它是利用具有表達盒和重組位點的載體通過同源重組將所述表達盒整合到粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces?pombe)的染色體的靶位點的轉化方法，所述表達盒包含在所述粟酒裂殖酵母內起作用的啟動子、異源蛋白質結構基因以及終止子，所述重組位點與所述粟酒裂殖酵母的染色體進行同源重組，其特征在于，所述粟酒裂殖酵母染色體的靶位點為轉座子基因Tf2中的堿基序列。

5.如權利要求1～4中任一項所述的粟酒裂殖酵母的轉化方法，其特征在于，選擇在2個以上的所述靶位點上整合有所述表達盒的轉化體。

6.如權利要求1～5中任一項所述的粟酒裂殖酵母的轉化方法，其特征在于，所述載體包含2個以上的表達盒。

7.如權利要求1～6中任一項所述的粟酒裂殖酵母的轉化方法，其特征在于，進行同源重組后，選擇整合于所述染色體的表達盒的總數為3～40個的轉化體。

8.如權利要求1～7中任一項所述的粟酒裂殖酵母的轉化方法，其特征在于，所述表達盒中的異源蛋白質結構基因的5’末端側具有在粟酒裂殖酵母內起作用的分泌信號基因。

9.轉化體，其特征在于，由權利要求1～8中任一項所述的轉化方法獲得。

10.異源蛋白質的制造方法，其特征在于，培養權利要求9所述的轉化體，獲取由該轉化體產生的異源蛋白質。

11.異源蛋白質的制造方法，其特征在于，在培養液中培養通過權利要求8所述的轉化方法獲得的轉化體，從所述培養液中獲取由該轉化體產生的異源蛋白質。