[實(shí)用新型]一種紫杉醇產(chǎn)生菌發(fā)酵紅豆杉枝葉生產(chǎn)紫杉醇新方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201020165294.0 | 申請日: | 2010-04-24 |
| 公開(公告)號: | CN101892162A | 公開(公告)日: | 2010-12-01 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 程斌;李耀亭;鄭蕾;萬賓;劉體云;潘勤;熊春盛 | 申請(專利權(quán))人: | 程斌 |
| 主分類號: | C12N1/14 | 分類號: | C12N1/14;C12P17/02;C12R1/645 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 230000 安徽省六安市解放*** | 國省代碼: | 安徽;34 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 紫杉醇 產(chǎn)生 發(fā)酵 紅豆杉 枝葉 生產(chǎn) 新方法 | ||
1.本發(fā)明涉及一種產(chǎn)紫杉醇新菌種,其特征是:所述的新菌種為從本地野生南方紅豆杉樹皮中分離篩選的菌株,該菌株于2007年委托中國微生物菌種保藏中心(CGMCC)作專利保存。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的產(chǎn)紫杉醇新菌種發(fā)酵紅豆杉枝葉生產(chǎn)紫杉醇方法,其特征是:
(1)菌株發(fā)酵培養(yǎng)基采用液體MS培養(yǎng)基;
(2)紅豆杉枝葉處理:紅豆杉新鮮枝葉經(jīng)過125℃蒸汽處理1min左右,溫度冷卻至室溫后,平鋪于通風(fēng)發(fā)酵池的發(fā)酵床上。
(3)發(fā)酵培養(yǎng):取活化的斜面菌種,接種于液體MS培養(yǎng)基中,每只搖瓶接1環(huán),在搖床上150r/min,25℃培養(yǎng)72h左右,作為種子液,按5%比例接入發(fā)酵罐進(jìn)行發(fā)酵,1.8L/min的通氣量25℃培養(yǎng)72h左右,用4倍于發(fā)酵液體積的液體基本MS培養(yǎng)基稀釋,作為紫杉醇生產(chǎn)用接種菌液,均勻噴灑于處理好的紅豆杉枝葉上,22℃±3℃條件下通風(fēng)發(fā)酵120h完成發(fā)酵過程。
(4)紫杉醇的提取:將發(fā)酵后的紅豆杉枝葉,機(jī)械打碎成漿,加入3倍于漿狀物體積的95%乙醇,攪拌均勻,靜置后分層,傾出上清液,沉淀層采用板框壓濾機(jī)壓濾,濾液與傾出的上清液合并后離心除去雜質(zhì),進(jìn)行低溫真空干燥,獲得膏狀紫杉醇粗品,回收乙醇可循環(huán)使用。?
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