[發明專利]白頭翁皂苷類物質在制備抗血吸蟲藥物中的應用及其該物質的制備方法

有效

• 申請號: 201010624574.8
• 申請日: 2010-12-31
• 公開（公告）號: CN102068445A
• 公開（公告）日: 2011-05-25
• 發明（設計）人: 楊世林;李孝賢;許瓊明;夏超明;朱衛豐;劉艷麗;簡輝;羅曉健;李笑然;馮育林
• 申請（專利權）人: 江西中醫學院
• 主分類號: A61K31/704
• 分類號: A61K31/704;A61P33/12;C07J63/00;C07H15/256;C07H1/08
• 代理公司: 江西省專利事務所 36100
• 代理人: 楊志宇

技術領域

本發明屬于醫藥、獸藥技術領域，涉及一種白頭翁皂苷類物質在制備抗血吸蟲藥物中的應用及其該物質的制備方法，該有效組分具有顯著的抗血吸蟲活性，可以用于人或其它哺乳動物血吸蟲病的預防治療。

背景技術

白頭翁藥材取自毛茛科白頭翁屬植物白頭翁(Pulsatilla?chinensis(Bunge)Regel)的干燥根，味苦，性寒。歸胃、大腸經，具清熱解毒，涼血止痢之功。用于熱毒血痢，陰癢帶下，阿米巴痢。據文獻報道，白頭翁中含原白頭翁素(Protoanemonin)、白頭翁素(Anemonin)、白頭翁靈(Okinalin，C32H46O2)、白頭翁英(Okinalein，C4H6O2)等，近年來國內外學者從白頭翁屬植物中分離鑒定出幾十種五環三萜皂苷成分，這些皂苷主要為齊墩果烷型和羽扇豆烷型兩種。白頭翁屬植物具有廣泛的藥理及生物活性，主要表現在抗腫瘤、抗炎抗菌、抗病毒、細胞凋亡、抗生物酶、殺蟲、殺精等作用。蘭繼毓等研究發現白頭翁煎劑對殺滅溶組織內阿米巴的效果較好。經檢索，沒有發現白頭翁藥材及其有效組分具有抗血吸蟲活性的文獻報道。

經過反復研究發現白頭翁水提液及醇提液均具有較強的抗血吸蟲活性，經過了系統研究，準備開發以白頭翁有效組分為主要成分，用于預防或治療人或其它哺乳動物血吸蟲病的藥物。

但白頭翁水提液及醇提液作為混合物中混有部分不起作用的物質，需要大劑量使用才有足夠的抗血吸蟲活性。

將白頭翁水提液及醇提液的混合物精制得到單一成分的化合物，有望確保足夠的抗血吸蟲活性的前提下，減少劑量。而單一成分的抗血吸蟲活性化合物和減少劑量是藥物產業化中的兩個非常重要的因素。

發明內容

本發明提供一種白頭翁皂苷類物質在制備抗血吸蟲藥物中的應用及其該物質的制備方法，該有效組分屬于單一成分的化合物，在低劑量的狀況下具有顯著抗血吸蟲活性，可以用于人或其它哺乳動物血吸蟲病的預防治療。

本發明所述的白頭翁皂苷類物質是單一成分的化合物，其化學名稱為3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。

3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷的制備方法為：

第一步、將白頭翁藥材粉碎成粗粉，用0-95％乙醇浸泡0.5-2h，6-12倍量加熱回流提取2-3次，每次1-3h，過濾，合并濾液。上述濾液于50-70℃減壓濃縮至0.5-1.0g生藥材/mL，0-4℃冷藏過夜，析膠，濾過，濾液用噴霧干燥法、真空微波干燥法或其它方法進行干燥，收集干浸膏或噴干粉，即得白頭翁提取物。

第二步、白頭翁提取物用水溶解，經過D101或AB-8或ADS-17大孔樹脂吸附，依次用水、35-45％乙醇、95％乙醇洗脫，收集35-45％乙醇洗脫部分。經抗血吸蟲藥理實驗，證明35-45％乙醇洗脫部分為白頭翁抗血吸蟲有效部位。

第三步、白頭翁抗血吸蟲有效部位經ODS反相硅膠柱，用甲醇和水(5∶5-10∶0)的混合液進行梯度洗脫，梯度洗脫液依次有五組，其體積配比分別為

第一組甲醇5份∶水5份；

第二組甲醇6份∶水4份；

第三組甲醇7份∶水3份；

第四組甲醇8份∶水2份；

第五組甲醇10份∶水0份；

收集甲醇7份∶水3份的洗脫部分，得到單一成分的化合物，經對照品比較及LC/MS/MS測試，該化合物為3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。

或者第一步、將白頭翁藥材粉碎成粗粉，用5-95％乙醇浸泡0.5-2h，6-12倍量加熱回流提取2-3次，每次1-3h，過濾，合并濾液。上述濾液于50-70℃減壓濃縮至0.5-1.0g生藥材/mL，0-4℃冷藏過夜，析膠，濾過，濾液用噴霧干燥法、真空微波干燥法或其它方法進行干燥，收集干浸膏或噴干粉，即得白頭翁提取物。其余技術方案類似。