[發明專利]一種發酵生產恩拉霉素的方法

有效

• 申請號: 201010624071.0
• 申請日: 2010-12-31
• 公開（公告）號: CN102174624A
• 公開（公告）日: 2011-09-07
• 發明（設計）人: 李榮杰;崔剛;尚海濤;付松
• 申請（專利權）人: 安徽豐原發酵技術工程研究有限公司
• 主分類號: C12P21/04
• 分類號: C12P21/04;C12R1/465
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王加嶺;張慶敏

技術領域

本發明涉及發酵技術領域，具體為一種發酵生產恩拉霉素的方法。

背景技術

恩拉霉素(Enramycin)，又名恩來霉素、恩素、安來霉素、持久霉素，它是一種環狀多肽類抗生素，由13個不同種類的17個氨基酸分子和脂肪酸分子組成，氨基酸組成環狀多肽，脂肪酸分子連在末端的天冬氨酸上，根據末端脂肪酸分子的不同分為恩拉霉素A和恩拉霉素B，恩拉霉素是這兩種組分的混合物，是由土壤中分離出來的放線菌(Streptomyces?fungieidious)發酵產的一種多膚類抗生素。恩拉霉素對革蘭氏陽性菌有很強的抑制作用，主要阻礙細菌細胞壁的合成。其敏感細菌有金黃色葡萄球菌等各種革蘭氏陽性球菌、枯草桿菌、炭疽桿菌、破傷風梭菌、肉毒梭菌、產氣莢膜梭菌等。長期使用恩拉霉素藥物不易產生抗藥性，且它能改變腸道內細菌的群落分布，有利于飼料營養成份的消化吸收，能夠促進動物體重增加和提高飼料的利用率，因此世界上許多國家推薦此藥物作為畜禽的抗生素和促生長劑。恩拉霉素的另一個特點是不易被吸收，因此畜禽體內殘留較少。具有優良的促生長和改善飼料利用率的作用，因此被世界上許多國家推薦作為抗生素促生長劑。該藥于1966年由日武田藥品工業株式會社研發，1974年在日本正式注冊，其后在許多國家被注冊和廣泛使用。1993年我國農業部批準該藥在我國注冊。2005年，國內生產企業與美國先靈葆雅動物保健品有限公司(Schering?Plough?Animal?Health?Corp.)開始合作生產恩拉霉素預混劑。

恩拉霉素發酵菌體對氧的需求量較高，當菌體濃度過高造成發酵過程氧供應不足，影響產量。如果菌體濃度過低，產恩拉霉素速度較慢，發酵周期過長，菌體老化，同樣達不到理想的效果。所以改善發酵液的溶氧是解決以上矛盾，提高發酵水平的有效途徑。

發明內容

本發明的目的在于提供一種發酵生產恩拉霉素的方法，用以解決現有發酵生產恩拉霉素的發酵液中溶氧不足的問題。

為實現上述目的，本發明一種發酵生產恩拉霉素的方法，發酵菌株在發酵培養基中恒溫培養的發酵過程中，往發酵液中補水，改善發酵液中的溶氧量，提高恩拉霉素的發酵水平。

所述發酵的菌株為殺真菌素鏈霉菌(Streptomyces?fungicidious)CGMCC?4.1312^T。

所述發酵培養基包括如下組分：玉米粉100g/L，玉米漿10g/L，硫酸銨3g/L，硫酸鋅0.1g/L，碳酸鈣20g/L。

其中，所述的發酵溫度為28℃，轉速為250～350r/min。

所述往發酵液中補水時間為發酵進入快速發酵期，優選發酵到40～96小時期間，更優選40～72小時期間，最優選72小時。

所述往發酵液中補水的補水量優選為發酵液體積的5％～20％，更優選為5％～10％，最優選10％。

本發明的優點：

本發明提供一種發酵生產恩拉霉素的方法，在發酵到一定時間，通過向發酵液中補水改善溶氧，能夠顯著提高恩拉霉素發酵水平。本發明簡單易行，在發酵培養過程中經適時適量補水后，恩拉霉素發酵水平的提高可達約130％。

具體實施方式

為以下實施例用于說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。

實施例1：

1)斜面培養：

殺真菌素鏈霉菌(Streptomyces?fungicidious)CGMCC?4.1312^T(購自中科院微生物所)在無菌條件下接種于固體斜面培養基上，28℃恒溫培養8天；

其中，所述固體斜面培養基包括如下組分：玉米粉20g/L，蛋白胨1g/L，ZnSO₄.7H₂O?0.1g/L，MnCl₂.4H₂O?0.02g/L，瓊脂15g/L。

2)發酵培養：

將步驟1)培養的菌種無菌條件下接種到發酵瓶中的發酵培養基上，28℃，300r/min，發酵至40小時，向發酵液中補水，補水量為發酵液體積的5％，發酵天數為8天，平均發酵水平為850U/ml；

其中，所述發酵培養基包括如下組分：玉米粉100g/L，玉米漿10g/L，硫酸銨3g/L，硫酸鋅0.1g/L，碳酸鈣20g/L。

實施例2：

1)斜面培養：

殺真菌素鏈霉菌(Streptomyces?fungicidious?CGMCC?4.1312^T)在無菌條件下接種于固體斜面培養基上，28℃恒溫培養8天；