[發明專利]GAP啟動子文庫在調節S-腺苷甲硫氨酸代謝途徑中的應用

有效

• 申請號: 201010621230.1
• 申請日: 2010-12-31
• 公開（公告）號: CN102559726A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 錢江潮;秦秀林;于曉光;儲炬;武曉樂;莊英萍;張嗣良
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: C12N15/63
• 分類號: C12N15/63;C12N15/113;C12N1/19;C12P19/40;C40B40/06;C12R1/84
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

1.一種突變型GAP啟動子文庫的用途，用于調控S-腺苷甲硫氨酸分解代謝途徑，從而調節S-腺苷甲硫氨酸的產量；

其中，所述的突變型GAP啟動子文庫包括選自SEQ?ID?NO：1、SEQ?ID?NO：2或SEQ?ID?NO：3所示核苷酸序列的啟動子。

2.如權利要求1所述的用途，其特征在于，所述的調控S-腺苷甲硫氨酸分解代謝途徑為：調控S-腺苷甲硫氨酸分解代謝途徑中β-胱硫醚合成酶的表達。

3.如權利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述的突變型GAP啟動子文庫包括選自SEQ?ID?NO：2或SEQ?ID?NO：3所示核苷酸序列的啟動子，用于提高S-腺苷甲硫氨酸的產量。

4.一種構建物，所述的構建物包括以下操作性相連的元件(5’→3’)：β-胱硫醚合成酶的編碼基因的5’側翼序列；抗性選擇標記；選自SEQ?ID?NO：1、SEQID?NO：2或SEQ?ID?NO：3所示核苷酸序列的啟動子；β-胱硫醚合成酶的編碼基因。

5.一種調節S-腺苷甲硫氨酸的產量的方法，包括：以選自突變型GAP啟動子文庫的啟動子來調節S-腺苷甲硫氨酸生產菌的S-腺苷甲硫氨酸分解代謝途徑中β-胱硫醚合成酶的表達，從而調節S-腺苷甲硫氨酸的產量；

其中，所述的突變型GAP啟動子文庫包括選自SEQ?ID?NO：1、SEQ?ID?NO：2或SEQ?ID?NO：3所示核苷酸序列的啟動子。

6.如權利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)提供一種表達載體，其中包含權利要求4所述的構建物；

(2)將(1)所述的表達載體轉化S-腺苷甲硫氨酸生產菌，使得所述的構建物整合到S-腺苷甲硫氨酸生產菌的基因組中，獲得重組S-腺苷甲硫氨酸生產菌；

(3)培養(2)所述的重組S-腺苷甲硫氨酸生產菌，從而該菌的S-腺苷甲硫氨酸的產量相對于基因組中未整合所述構建物的S-腺苷甲硫氨酸生產菌發生改變。

7.如權利要求5所述的方法，其特征在于，所述的選自權利要求1所述的突變型GAP啟動子文庫的啟動子包括選自SEQ?ID?NO：2或SEQ?ID?NO：3所示核苷酸序列的啟動子，其下調β-胱硫醚合成酶的表達，從而提高S-腺苷甲硫氨酸的產量。

8.一種重組的S-腺苷甲硫氨酸生產菌，其基因組中整合有權利要求4所述的構建物。

9.一種突變型GAP啟動子，所述的啟動子的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：3所示。

10.權利要求9所述的突變型GAP啟動子的用途，用于下調S-腺苷甲硫氨酸分解代謝途徑中β-胱硫醚合成酶的表達，從而提高S-腺苷甲硫氨酸的產量。