[發明專利]一種微量,快速和精確檢測人紅細胞抗原和血清中抗體的方法

無效

• 申請號: 201010618200.5
• 申請日: 2010-12-31
• 公開（公告）號: CN102175877A
• 公開（公告）日: 2011-09-07
• 發明（設計）人: 胡當玉;周凝;周勝利
• 申請（專利權）人: 周勝利
• 主分類號: G01N33/80
• 分類號: G01N33/80;G01N33/577;G01N33/543
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種微量，快速和精確檢測人體紅細胞抗原和血清中抗體的方法，其特征在于，包括如下步驟：選微型配型板步驟，其板型為30，60，72或其它孔微型配型板，用以測定紅細胞抗原和血清抗體；

遴選抗體步驟，在所述微型版中的抗紅細胞抗原抗體可以是多克隆抗體，也可以是單克隆抗體，可以是液狀抗體，也可以是干燥粉狀抗體；遴選紅細胞步驟，在所述微型版中的紅細胞可以是新鮮紅細胞，也可以是冰凍紅細胞，也可以是冷凍干燥紅細胞，也可以是紅細胞膜；

分別進行制備正向紅細胞凝結及反向紅細胞配型檢測盒的步驟，其中，所述制備正向紅細胞凝結檢測盒的步驟包括用于檢測每個人血清內的、包括A，B，O；Rh等抗原系統、P，MNS，Kell，Luthern，Kell，Duffy和Kidd等紅細胞系統，以及任何其它有關的紅細胞系統的檢測方法，即在所述微型版中的每個孔內加入1微升或以上的已知單克隆或多克隆抗紅細胞抗原的抗體，制備成用于檢測每個人的紅細胞表型抗原抗體檢測盒；所述制備反向紅細胞配型檢測盒是指為用于測定紅細胞抗原而在所述微型配型板預先放入孔內1微升或以上的已知單克隆或多克隆抗紅細胞抗原的抗體用于檢測紅細胞抗原，制備成用于檢測每個人的紅細胞表型抗原抗體檢測盒；

直接反應或間接反應檢測人血清內的抗紅細胞抗體或紅細胞抗原系統的步驟，其中，直接反應是觀察抗體和抗原直接的免疫反應引起的紅細胞凝集現象；間接反應是將抗體和抗原在攝氏37度，四度孵育一定時間15、30分鐘以后，洗去多余的抗體和抗原，加入第二抗體，像抗人體免疫球蛋白，從而產生的間接的免疫反應的紅細胞凝集現象，用于鑒定相應的抗體或抗原；

檢測人體血清內的抗紅細胞抗體或紅細胞抗原系統的免疫反應步驟，通過外加各種試劑去加強免疫反應，其中，可采用白蛋白，聚多糖等去增強免疫反應；

檢測抗體和抗原免疫反應引起的紅細胞凝集現象的步驟，可以通過放大鏡或顯微鏡，判斷分析紅細胞凝集現象，判斷血清抗體或抗原；

篩選血液中存在的抗紅細胞抗原的抗體的步驟，即先用1微升紅細胞和血清反應，如若有紅細胞聚集反應，然后再進一步檢測具體的抗紅細胞抗體。

2.根據權利要求1所述的一種微量，快速和精確檢測人體紅細胞抗原和血清中抗體的方法，其特征在于，所述檢測抗體和抗原免疫反應引起的紅細胞凝集現象的步驟，包括采取所述微型血型檢測板的數據且將所采集的數據與計算機實時連接的步驟，通過計算機分析紅細胞凝集現象，判斷血清抗體或抗原，也可把紅細胞凝集現象保存在計算機內供以后分析或也可與分光光度計機相連接，結合著計算機，成為半自動化或自動化分析紅細胞凝集現象，判斷血清抗體或抗原。

3.根據權利要求1所述的一種微量，快速和精確檢測人體紅細胞抗原和血清中抗體的方法，其特征在于，所述的配型板可以供臨床或血庫應用，其中，所述正向紅細胞配型板的應用方式是，在所述配型板中加入1微升單克隆或多克隆抗體和5微升礦物油放于深低溫冰箱存放，并以干冰保存運輸給臨床或血庫應用，而所述的反向紅細胞配型板的應用方式是，在所述配型板中加入1微升新鮮紅細胞或紅細胞膜蛋白和5微升礦物油放于深低溫冰箱存放，并以干冰保存運輸給臨床或血庫應用。

4.根據權利要求1所述的一種微量，快速和精確檢測人體紅細胞抗原和血清中抗體的方法，其特征在于，所述方法還包括采用微量血量判斷血型抗原或抗體的步驟，其步驟是，檢測者可以通過靜脈，也可以從末梢血管收集全血，經離心后分離出血清和紅細胞，紅細胞用正常生理鹽水稀釋到1％到3％，取出1微升稀釋的紅細胞加入到所述微型配型板的孔中，再離心30秒到1分鐘，離心速度在300到1000rpm，然后用吹風或搖晃打散離心后的紅細胞，由此可從所述微型配型板直接用顯微鏡觀察結果，并根據紅細胞凝聚的程度，將其凝聚結果打分，從0加號到4個加號；0加號為沒有紅細胞凝聚，為陰性反應，不存在相應的抗原，而4個加號為強陽性，存在相應的抗原。