[發明專利]防治番茄根結線蟲的拮抗菌及其微生物有機肥料

有效

• 申請號: 201010610115.4
• 申請日: 2010-12-29
• 公開（公告）號: CN102154159A
• 公開（公告）日: 2011-08-17
• 發明（設計）人: 沈其榮;肖同建;冉煒;李榮;楊興明
• 申請（專利權）人: 南京農業大學;江蘇新天地生物肥料工程中心有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05G3/02;C05F17/00;C12R1/085
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 張素卿

一、技術領域

本發明涉及一種防治番茄根結線蟲的拮抗菌及其微生物有機肥料，屬于農業集約化生產技術，專用于防治番茄根結線蟲的危害。

二、背景技術

根結線蟲是危害作物的主要土傳病害之一。根結線蟲在全世界各地和大部分作物上都有發生，每年造成全世界糧食產量和經濟收入的巨大損失。根結線蟲侵染根系后，嚴重影響植株根系的發育，出現大量根結現象，導致植株對水分和養分的吸收受阻，植株出現矮小黃化現象。作物連作后，隨著連作年限的增加，根結線蟲在植物根系中產生大量的蟲卵并孵化出來，土壤中二齡幼蟲數量逐年積累，危害逐年加重，常造成作物大量減產，甚至死苗。研究結果表明，連作番茄根結線蟲病害的關鍵問題不是養分缺乏或營養不平衡，也不是土壤次生鹽漬化問題，而是土壤中的微生物區系變化及其次生代謝物質的致毒問題。

另一方面，水稻、小麥、玉米、油菜等作物秸稈就地焚燒、規模化養殖后的畜禽糞便隨地棄置等，使大量的養分資源流失于土壤-植物系統之外，不僅嚴重污染了環境，也極大地浪費了能作為有機肥和生物有機肥生產原料的有機物資源，不利于我國農業的可持續發展。如何將從土壤中因作物收獲而取走的營養元素最大限度地歸還到土壤中去，唯一的途徑就是將這些固體有機廢棄物制成商品有機肥料再施入土壤。將這些固體有機廢棄物經過高溫發酵合成高品位的有機堆肥，再用作功能菌的載體，制成功能明確的微生物有機肥料，具有廣闊的應用前景。

三、發明內容

1.?技術問題??

本發明的目的是提供一種能防治連作番茄根結線蟲的拮抗菌及其微生物有機肥料，使連作番茄根結線蟲的根結發病指數減少，使大量的設施農業土壤和露地番茄連作障礙土壤得到較大程度的生物修復，確保集約化農業的順利發展。

技術方案

能防治連作番茄根結線蟲的拮抗菌X5，屬于蠟狀芽孢桿菌（Bacillus?cereus），保藏日期?2010年9月14日，保藏號CGMCC?4161?；地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（CGMCC）。

拮抗菌X5的主要形態特性為：革蘭氏染色陽性G⁺，能運動，有側生鞭毛，形狀為桿狀，產芽孢，菌落呈乳白色，圓形，邊緣不整齊，表面濕潤光滑。

拮抗菌X5的主要生理生化特性：革蘭氏染色陽性G⁺，細胞形狀為桿狀，芽孢中生，接觸酶陽性、V.P.反應陰性，甲基紅試驗陽性，吲哚試驗陽性，發酵葡萄糖、木糖、L-阿拉伯糖、甘露醇產酸，能利用檸檬酸鹽，硝酸還原酶陽性，淀粉水解陽性，明膠水解陽性，分解酪蛋白陽性，油脂水解陽性，苯丙氨酸脫氫酶試驗陰性。

用上述拮抗菌X5生產的防治番茄根結線蟲的微生物有機肥料，該肥料中含有1×10^8?cfu·g^-1以上的拮抗菌、全氮質量比含量為4~5%，全氮中質量比90%以上為有機氮，總氮磷鉀養分質量比為6~10%、有機質質量比含量為30~35%。

所述以上微生物有機肥料的生產方法，包括：

1）拮抗菌X5分別接種到改良的牛肉膏液體培養基，進行發酵生產，其發酵生產的條件為：pH?6.8~7.5,?培養溫度30~35℃，攪拌速度為180~300?rpm，發酵中后期形成芽孢，發酵液中的拮抗菌含菌或芽孢量≥1×10¹⁰?cfu·ml^-1；改良的牛肉膏液體培養基的配制方法：稱量2.0克牛肉膏，玉米粉5.0克，麥麩5.0克，土豆淀粉5.0克，氯化鈉5.0于燒杯中，攪拌，使之充分溶解混勻，pH值調至7.2~7.4，并用自來水定容至1000?ml，121℃滅菌20?min。

2）將拮抗菌X5發酵液與腐熟后的豬糞堆肥和菜粕微生物酶解物的混合物進行固體發酵，每噸固體有機物料中加入X5發酵液55L，混合均勻，固體發酵過程中每天翻堆1次，使固體發酵溫度不超過50℃，發酵5天后結束，使拮抗菌X5含量達到1×10^8?cfu·g^-1以上，獲得含拮抗菌X5的微生物有機肥。將此微生物有機肥在低于60℃下干燥至30%的含水量，包裝出廠即為能防治番茄根結線蟲的微生物有機肥。其中：

腐熟后的豬糞堆肥：發芽指數為98%以上,有機質質量比含量≥35%，有機氮質量比含量為1.2~2%，含水量質量比25~30%。