[發明專利]防治番茄根結線蟲的拮抗菌及其微生物有機肥料

有效

• 申請號: 201010610115.4
• 申請日: 2010-12-29
• 公開（公告）號: CN102154159A
• 公開（公告）日: 2011-08-17
• 發明（設計）人: 沈其榮;肖同建;冉煒;李榮;楊興明
• 申請（專利權）人: 南京農業大學;江蘇新天地生物肥料工程中心有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05G3/02;C05F17/00;C12R1/085
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 張素卿

1.能防治番茄根結線蟲的拮抗菌菌株X5，屬于蠟狀芽孢桿菌（Bacillus?cereus），保藏日期?2010年9月14日，保藏號CGMCC?No.4161?；

拮抗菌X5屬于蠟狀芽孢桿菌（Bacillus?cereus），主要形態特性為：革蘭氏陽性G⁺，能運動，有側生鞭毛，形狀為桿狀，產芽孢，菌落呈乳白色，圓形，邊緣不整齊，表面濕潤光滑；

生理生化特征：接觸酶陽性、V.P.反應陰性，甲基紅試驗陽性，吲哚試驗陽性，發酵葡萄糖、木糖、L-阿拉伯糖、甘露醇產酸，能利用檸檬酸鹽，硝酸還原酶陽性，淀粉水解陽性，明膠水解陽性，分解酪蛋白陽性，油脂水解陽性，苯丙氨酸脫氫酶試驗陰性。

2.用權利要求1所述拮抗菌X5生產的微生物有機肥料。

3.根據權利要求2所述的微生物有機肥料，拮抗菌X5數量為1×10^8?cfu·g^-1以上，全氮質量比含量為4~5%，全氮中質量比90%以上為有機氮，總氮磷鉀養分質量比為6~10%、有機質質量比含量為30~35%。

4.權利要求2或3所述微生物有機肥料的生產方法，包括：?

將權利要求1所述的拮抗菌X5分別接種到改良的牛肉膏液體培養基，進行發酵生產，其發酵生產的條件為：pH?6.8~7.5,?培養溫度30~35℃，攪拌速度為180~300?rpm，發酵中后期形成芽孢，發酵液中的拮抗菌含菌或芽孢量≥1×10¹⁰?cfu·ml^-1；

2）將拮抗菌X5發酵液與腐熟后的豬糞堆肥和菜粕微生物酶解物的混合物進行固體發酵，每噸固體有機物料中加入X5發酵液55L，混合均勻，固體發酵過程中每天翻堆1次，使固體發酵溫度不超過50℃，發酵5天后結束，使拮抗菌X5含量達到1×10^8?cfu·g^-1以上，獲得含拮抗菌X5的微生物有機肥，將此微生物有機肥在低于60℃下干燥至30%的含水量，包裝出廠即為能防治番茄根結線蟲的微生物有機肥，其中：

腐熟后的豬糞堆肥：發芽指數為98%以上,有機質質量比含量≥35%，有機氮質量比含量為1.2~2%，含水量質量比25~30%；

菜粕微生物酶解物的制備方法：將保藏號為CGMCC?NO.1543的嗜麥芽寡養單胞菌（Stenotrophomonas?maltophilia）菌株37-1發酵液加入到菜粕原料中，調節含水量55~65%和pH?6.0~7.5，進行開放式固體發酵，待發酵溫度上升至50℃時立即開始翻堆，以后每天翻堆，使堆溫始終維持在35~50℃共5天，固體發酵開始后，堆物的pH會不斷上升，每次翻堆時用含酸液體調節含水量和pH，使它們分別維持在55~65%和6.0~7.0，發酵終止時再用含酸液體進行噴灑，直至堆物pH調整為5.0左右，再進行低溫干燥或自然涼干，即為菜粕微生物酶解物；

腐熟的豬糞堆肥和菜粕微生物酶解物的混合物制備方法：將腐熟的豬糞堆肥與菜粕微生物酶解物按體積比50~70%∶50~30%的比例充分混合，并后熟2~3天，后熟過程中翻堆2次。

5.根據權利要求4所述微生物有機肥料的生產方法，其中步驟1）所用改良的牛肉膏培養液配制方法為：稱量2.0克牛肉膏，玉米粉5.0克，麥麩5.0克，土豆淀粉5.0克，氯化鈉5.0于燒杯中，攪拌，使之充分溶解混勻，pH值調至7.2~7.4，并用自來水定容至1000?ml，121℃滅菌20?min。

6.權利要求2或3所述微生物有機肥料的在防治番茄根結線蟲病中的應用。