[發(fā)明專利]從中藥材圓錐鐵線蓮中分離純化活性成分金色酰胺醇酯的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010606380.5
• 申請(qǐng)日: 2010-12-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102070485A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-05-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田景奎;陳潤(rùn)澤;張琳;應(yīng)弘梅;崔磊;龐亞京;戚中杰;翟興英;傅之容
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號(hào): C07C237/22
• 分類號(hào): C07C237/22;C07C231/24;A61P35/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務(wù)所有限公司 33200
• 代理人: 張法高

1.一種從藥用植物圓錐鐵線蓮中分離純化生物活性成分金色酰胺醇酯的方法，其特征在于它的步驟如下：

A：將新鮮采摘的毛茛科圓錐鐵線蓮藥材全草或莖葉于室溫下陰干，切段，加入2～50倍體積份濃度為1%～100%的乙醇，采用冷浸、滲漉、煎煮、超聲、加熱回流或微波進(jìn)行提取，提取時(shí)間為0.1～5小時(shí)，過(guò)濾，藥渣用上述方法再提取2～10次，合并提取液，回收乙醇，得到總提物浸膏；

B：取步驟A中總提物浸膏用1～20倍體積份的水稀釋，上裝有非極性、弱極性或中極性中的任意一種大孔樹(shù)脂分離柱進(jìn)行純化，大孔樹(shù)脂用量為藥材量的2～40倍重量份，分離柱的徑高比為1：3～30，吸附流速為1～10BV/h；先用體積比為0.1%～50%的乙醇和水洗脫1～20BV，流速1～20BV/h；再用體積比為50%～100%的乙醇和水洗脫1～30BV，流速1～30BV/h，收集體積比為50%～100%的乙醇和水洗脫部分，回收乙醇，得到總提物純化部分；

C：取步驟B中總提物純化部分，拌入1～10倍重量份100～200目硅膠，將溶劑揮干得到拌樣硅膠；另取10～100倍重量份100～200目硅膠，干法裝柱，徑高比為1:3～30，將拌樣硅膠加入柱頂，上加硅膠做保護(hù)層，以氯仿-甲醇混合溶劑系統(tǒng)進(jìn)行梯度洗脫，收集體積比為99:1～50:50的氯仿和甲醇洗脫液部分，薄層檢識(shí)，

薄層色譜條件為：正向硅膠G預(yù)制板；展開(kāi)劑為99:1～80:20的氯仿-甲醇，

合并并回收洗脫溶劑，得到濃縮物；

D：取步驟C中濃縮物，拌入1～10倍重量份100～200目硅膠，將溶劑揮干得到拌樣硅膠；另取10～100倍重量份100～200目硅膠，干法裝柱，徑高比為1:3～30，將拌樣硅膠加入柱頂，上加硅膠做保護(hù)層，以石油醚-乙酸乙酯混合溶劑系統(tǒng)進(jìn)行梯度洗脫，收集體積比為99:1～50:50的石油醚和乙酸乙酯洗脫液部分，薄層檢識(shí)，

薄層色譜條件為：正向硅膠G預(yù)制板；展開(kāi)劑為99:1～80:20的氯仿-甲醇，

合并并回收洗脫溶劑，得到濃縮物；

E：取步驟D中濃縮物，溶解于體積比為99:1～1:99的氯仿和甲醇混合溶劑中，上Sephadex?LH-20凝膠色譜柱進(jìn)行純化，溶解后濃縮物上樣體積為凝膠柱保留體積的5%～20%，采用體積比為99:1～1:99的氯仿和甲醇混合溶劑進(jìn)行等度洗脫，收集不同流份，薄層檢識(shí)，

薄層色譜條件為：正向硅膠G預(yù)制板；展開(kāi)劑為99:1～80:20的氯仿-甲醇，

合并含有金色酰胺醇酯的流份，回收氯仿和甲醇，得到金色酰胺醇酯純品。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從藥用植物圓錐鐵線蓮中分離純化生物活性成分金色酰胺醇酯的方法，其特征是：所述步驟A為將新鮮采摘的毛茛科圓錐鐵線蓮藥材全草或莖葉于室溫下陰干，切段，加入5～30倍體積份濃度為10%～100%的乙醇，采用冷浸、滲漉、煎煮、超聲、加熱回流或微波進(jìn)行提取，提取時(shí)間為0.5～3小時(shí)，過(guò)濾，藥渣用上述方法再提取2～6次，合并提取液，回收乙醇，得到總提物浸膏。

3.??根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從藥用植物圓錐鐵線蓮中分離純化生物活性成分金色酰胺醇酯的方法，其特征是：所述步驟B為取步驟A中總提物浸膏用3～10倍體積份的水稀釋，上裝有非極性、弱極性或中極性中的任意一種大孔樹(shù)脂分離柱進(jìn)行純化，大孔樹(shù)脂用量為藥材量的2～20倍重量份，分離柱的徑高比為1：5～10，吸附流速為1～5BV/h；先用體積比為0.5%～50%的乙醇和水洗脫2～10BV，流速2～10BV/h；再用體積比為60%～100%的乙醇和水洗脫2～15BV，流速2～15BV/h，收集體積比為60%～100%的乙醇和水洗脫部分，回收乙醇，得到總提物純化部分。

4.???根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從藥用植物圓錐鐵線蓮中分離純化生物活性成分金色酰胺醇酯的方法，其特征是：所述步驟C為取步驟B中總提物純化部分，拌入2～4倍重量份100～200目硅膠，將溶劑揮干得到拌樣硅膠；另取30～70倍重量份100～200目硅膠，干法裝柱，徑高比為1:5～20，將拌樣硅膠加入柱頂，上加硅膠做保護(hù)層，以氯仿-甲醇混合溶劑系統(tǒng)進(jìn)行梯度洗脫，收集體積比為99:1～80:20的氯仿和甲醇洗脫液部分，薄層檢識(shí)，薄層色譜條件為：正向硅膠G預(yù)制板；展開(kāi)劑為99:1～90:10的氯仿-甲醇，合并并回收洗脫溶劑，得到濃縮物。