[發明專利]一種整合牛NRAMP1巨噬細胞特異性表達載體/牛成纖維細胞及其方法

無效

• 申請號: 201010603533.0
• 申請日: 2010-12-17
• 公開（公告）號: CN102559749A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 王華巖;程祥;鄧捷;馬曉玲;孟書燕;來威鋒
• 申請（專利權）人: 西北農林科技大學
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;C12N5/10;C12N15/06
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技術領域

本發明屬于轉基因克隆動物技術領域，涉及轉基因克隆胚的核供體細胞的構建，特別涉及到一種整合牛NRAMP1巨噬細胞特異性表達載體的牛成纖維細胞。

背景技術

布氏桿菌病(Brucellosis)是由布氏桿菌(Brucella?abortus)引起人畜共患的一種慢性傳染病，其臨床特點主要表現為流產、長期發熱、睪丸炎、腱鞘炎和關節炎等，病理特征為全身彌漫性網狀內皮細胞增生和肉芽腫結節形成。本病所累及的組織器官很廣泛，以單核-巨噬細胞系統、骨關節系統、神經系統等最為常見。布氏桿菌為細小的短桿狀或球桿狀，不產生芽胞，革蘭氏陰性的桿菌。病原布氏桿菌共分為牛、羊、豬、沙林鼠、綿羊和犬布氏桿菌六種。病原菌主要通過體表皮膚粘膜的接觸傳播，亦可通過消化道傳播，且可以通過含有布氏桿菌的氣溶膠感染人或動物。布氏桿菌病嚴重地危害人類的身心健康并影響畜牧業的發展。

人感染布病常常是緩慢發病，輕度感染者僅感到疲乏，頭痛，關節肌肉酸痛，或無任何自覺癥狀，典型病例表現體溫熱型呈波浪狀、寒顫、關節痛、神經痛、睪丸炎、滑囊炎、腱鞘炎，個別患者關節硬化。人患布氏桿菌病后嚴重影響人的生活和生育能力。布病引起雌性動物流產、不孕等癥狀，母畜流產后多伴發胎衣停滯和子宮內膜炎，影響妊娠并導致不育。布病可引起雄性動物則出現睪丸炎和附睪炎，導致配種能力降低，造成嚴重經濟損失。

在世界200多個國家和地區中，170多個國家和地區有布氏桿菌病存在和流行。約占世界1/5-1/6的人口受布病的威脅，全世界現約有500-600萬人患布氏桿菌病，年新發病人約有50萬(布合麗切木·依干巴地，等.布魯氏桿菌病的危害及其防治.草食家畜，2007，3：60-61)。在中國有25個省(市)、自治區有布氏桿菌病存在和流行，1200多個縣市為布魯氏桿菌病疫區，約有3.5億人遭受布氏桿菌病威脅，(尚德秋.布魯氏桿菌病研究進展.中國地方病防治雜志，2004，19(4)：204-212)。

布氏桿菌在體內廣泛分布且是兼性細胞內寄生菌，普通藥物不易生效。目前對于本病的治療尚無理想的方法，一般采用檢疫、淘汰病畜來防止動物的流行和擴散，仍是以預防為主。在疫苗接種過程中也存在一系列問題(趙富有；等.布氏桿菌病防控及疫苗使用的探討.獸醫導刊，2010，3：24-27)，如有些菌苗由于菌株毒力過大，接種反應強烈，有些菌苗效力還不十分理想，有些菌苗不能用于懷孕動物，還有的菌苗不能用于成年動物、種公畜和患病動物等，這些因素限制了菌苗的應用，造成接種密度不高而影響防治效果。