[發(fā)明專利]一種纖維堆囊菌高密度發(fā)酵與埃博霉素產(chǎn)物分離偶聯(lián)的生產(chǎn)工藝

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010603114.7
• 申請日: 2010-12-24
• 公開（公告）號: CN102174426A
• 公開（公告）日: 2011-09-07
• 發(fā)明（設計）人: 劉新利;趙林;陸震;高海燕;顧文雪;李亞偉
• 申請（專利權）人: 山東輕工業(yè)學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P17/18;C07D493/04;C12R1/01
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• 代理人: 暫無信息

1.一種纖維堆囊菌高密度發(fā)酵與埃博霉素產(chǎn)物分離偶聯(lián)的生產(chǎn)工藝，其特征在于：通過流加工藝，包括碳氮源物質(zhì)和前體物質(zhì)，實現(xiàn)纖維堆囊菌的高密度發(fā)酵；同時使用可以多次循環(huán)利用的吸附樹脂，實現(xiàn)埃博霉素產(chǎn)物分離，并將高密度發(fā)酵與產(chǎn)物分離偶聯(lián)。

2.如權利要求1所述的流加工藝，其特征在于從發(fā)酵開始后的第30-70h補加濃度為2g/L的葡萄糖，每小時流加原始發(fā)酵液體積的0.01-0.1％。從發(fā)酵過程中的第70-120h添加前體營養(yǎng)物質(zhì)混合液。該混合液放入發(fā)酵罐補料瓶內(nèi)，滅菌后采用蠕動泵自動流加，每小時流加原始發(fā)酵液體積的0.01-0.05％。

如2所述的前體物質(zhì)混合液配方為：蘇氨酸5mg/L、絲氨酸(Ser)5mg/L、蛋氨酸和半胱氨酸各2mg/L、乙酸鈉20mg/L、丙酮酸30mg/L、VB₁₂1mg/L、玉米漿2g/L。葡萄糖和前體物質(zhì)混合液使用前用去離子水配制，121℃滅菌20min使用。

3.如權利要求1所述的發(fā)酵和產(chǎn)物分離偶聯(lián)工藝，其特征在于：通過與發(fā)酵偶聯(lián)的吸附樹脂柱連續(xù)吸附發(fā)酵液中的埃博霉素，具體工藝流程為：

發(fā)酵液→蠕動泵→樹脂柱→發(fā)酵液回流至發(fā)酵罐。

如3所述的吸附樹脂用量為原始發(fā)酵液體積的0.5-3％；使用前樹脂柱及管路要滅菌，樹脂柱啟用時間為發(fā)酵開始后的第48小時，發(fā)酵液循環(huán)速度為每分鐘10-100mL，循環(huán)吸附72h更換樹脂柱，2-4個樹脂柱輪流使用，當樹脂吸附72h后，通過樹脂體積6-10倍的甲醇洗脫收集埃博霉素，并用6-10倍的去離子水依次洗滌樹脂，實現(xiàn)樹脂再生，滅菌后繼續(xù)循環(huán)使用。

4.如權利要求1所述的一種纖維堆囊菌高密度發(fā)酵與埃博霉素產(chǎn)物分離偶聯(lián)的生產(chǎn)工藝在纖維堆囊菌發(fā)酵生產(chǎn)埃博霉素類化合物方面的應用。