[發明專利]一種同時檢測格列苯脲和格列齊特的雙通道檢測卡及其檢測方法

無效

• 申請號: 201010602055.1
• 申請日: 2010-12-23
• 公開（公告）號: CN102087281A
• 公開（公告）日: 2011-06-08
• 發明（設計）人: 周堅;熊曉芳;吳文曄
• 申請（專利權）人: 無錫安迪生物工程有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所 32104
• 代理人: 時旭丹;劉品超

技術領域

本發明涉及一種檢測降糖中藥中非法添加西藥成分的器具，特別是涉及一種同時檢測格列苯脲和格列齊特的雙通道檢測卡，屬于中藥非法添加西藥成分檢測技術領域。

背景技術

格列苯脲和格列齊特都屬于磺酰脲類降糖藥物,?主要通過促進胰島素分泌而發揮作用，此外，還可加強胰島素與受體結合，解除受體被胰島素抵抗的作用，使胰島素作用加強。療效確切而且價格低廉,?臨床應用廣泛,?但也具有一定的毒副作用。?格列苯脲可造成低血糖癥以及其它一系列如腎上腺皮質功能減退、致畸等嚴重不良反應。然而一些不法廠家為了增強降糖效果,?將其摻入降糖保健食品中,?使患者在不知情的情況下大量服用,?造成嚴重后果。因此建立一種準確可靠的分析方法,?對非法添加這些化學物質進行檢測是非常必要的。

目前，現有技術對于格列苯脲和格列齊特的檢測主要依賴色譜和質譜技術,?這些方法對實驗儀器設備要求高，操作繁瑣，對操作人員的專業知識要求高，費時費力。因此建立一種準確可靠又快速方便的檢測中藥中西藥成分的分析方法是非常必要的。

發明內容

本發明的目的在于提供一種能同時檢測格列苯脲和格列齊特的器具，克服現有技術操作繁瑣、專業要求高的缺陷，用于查處偽劣產品，保證用藥安全。

本發明的技術方案：一種同時檢測格列苯脲和格列齊特的雙通道檢測卡，在長條扁平薄殼狀的檢測卡外殼1中設置測試條2，檢測卡外殼表面有檢測窗孔3和加樣孔4,測試條是由支承背板5上粘貼五種元件組成：支承背板中部粘貼硝酸纖維素膜6，支承背板一端部上疊置粘貼吸水膜10，另一端部上疊置粘貼樣品墊9，吸水膜內端與樣品墊內端各自分別與硝酸纖維素膜一端搭接，在樣品墊與硝酸纖維素膜的搭接部，兩者之間夾置粘貼兩段膠體金膜7、8,膠體金膜7、8依次是含抗格列苯脲單克隆抗體膠體金標記物、抗格列齊特單克隆抗體膠體金標記物的玻璃纖維膜；硝酸纖維素膜上橫向有三條間隔開的顯示印跡帶：一條是含格列苯脲蛋白質偶聯物的檢測帶11，另一條是含格列齊特蛋白質偶聯物的檢測帶12，第三條是含抗兔抗體或抗鼠抗體的質控帶13；測試條置入檢測卡外殼內，樣品墊正對加樣孔，硝酸纖維素膜正對檢測窗孔。

應用免疫學的方法直接檢測樣品中格列苯脲和格列齊特的含量，檢測樣品為膠囊、片劑、藥丸等降糖中藥樣品，處理方法如下：

（1）隨機采集一定量的待測樣本，粉碎均勻。

（2）稱取5g粉碎后的樣品，加入10mL樣品抽提液，充分攪拌混合5min以上，震蕩反應30min。

抽提液配置如下：在70mL甲醇中加入30mL蒸餾水。

（3）將步驟（2）所得溶液移入10mL離心管，4000r/min離心10min，取離心后的上清液；若上清液澄清，則按上清液︰樣品稀釋液為1︰3的比例稀釋，即取上清液100μL加入300μL樣品稀釋液，混合均勻后測定；若上清液渾濁，則用濾紙過濾，取過濾后的上清液按上清液100μL加入300μL樣品稀釋液進行稀釋，混合均勻后測定。

樣品稀釋液為pH7.6、10mmoL?PBST溶液。

檢測帶11、12和質控帶13同時顯現棕紅色印跡，表示檢測結果為陰性，說明被檢測樣品中格列苯脲和格列齊特均未超標。

檢測帶11、12不顯示顏色，只有質控帶13顯現棕紅色印跡，檢測結果為陽性，表明被檢測樣品中格列苯脲和格列齊特均超標。

檢測帶11不顯示顏色，檢測帶12和質控帶13同時顯現棕紅色印跡，檢測結果為陽性，表明被檢測樣品中格列苯脲超標，而格列齊特未超標。

檢測帶12不顯示顏色，檢測帶11和質控帶13同時顯現棕紅色印跡，檢測結果為陽性，表明被檢測樣品中格列齊特超標，而格列苯脲未超標。

檢測帶11、12和質控帶13均不顯色，則表明檢測試條失效。

本發明的優點是能同時檢測出降糖中藥樣品中的格列苯脲和格列齊特，易于制備且節省檢測費用，使用方便，檢測快速，靈敏度高，結果準確。

附圖說明

圖1格列苯脲和格列齊特的雙通道檢測卡及測試條在外殼內的安置圖。1、外殼，2、測試條，3、檢測窗孔，4、加樣孔。

圖2格列苯脲和格列齊特的雙通道檢測卡的檢測試條結構示意圖。5、支承背板，6、硝酸纖維素膜，7、膠體金膜（含抗格列苯脲單克隆抗體膠體金標記物的玻璃纖維膜），8、膠體金膜（含抗格列齊特單克隆抗體膠體金標記物的玻璃纖維膜），樣品墊9，吸水膜10。

圖3檢測試條的硝酸玻璃纖維膜上顯示印跡示意圖。6、硝酸纖維素膜，11、檢測帶（含格列苯脲蛋白質偶聯物），12、檢測帶（含格列齊特蛋白質偶聯物），13、質控帶。

具體實施方式