[發明專利]一種同時檢測格列苯脲和格列齊特的雙通道檢測卡及其檢測方法

無效

• 申請號: 201010602055.1
• 申請日: 2010-12-23
• 公開（公告）號: CN102087281A
• 公開（公告）日: 2011-06-08
• 發明（設計）人: 周堅;熊曉芳;吳文曄
• 申請（專利權）人: 無錫安迪生物工程有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所 32104
• 代理人: 時旭丹;劉品超

1.一種同時檢測格列苯脲和格列齊特的雙通道檢測卡，其特征在于在長條扁平薄殼狀的檢測卡外殼（1）中設置測試條（2），檢測卡外殼表面有檢測窗孔（3）和加樣孔（4）；測試條是由支承背板（5）上粘貼五種元件組成：支承背板中部粘貼硝酸纖維素膜（6），支承背板一端部上疊置粘貼吸水膜（10），另一端部上疊置粘貼樣品墊（9），吸水膜內端與樣品墊內端各自分別與硝酸纖維素膜一端搭接，在樣品墊與硝酸纖維素膜的搭接部，兩者之間夾置粘貼兩段膠體金膜（7）、（8），膠體金膜（7）、（8）依次是含抗格列苯脲單克隆抗體膠體金標記物、抗格列齊特單克隆抗體膠體金標記物的玻璃纖維膜；硝酸纖維素膜上橫向有三條間隔開的顯示印跡帶：一條是含格列苯脲蛋白質偶聯物的檢測帶（11），另一條是含格列齊特蛋白質偶聯物的檢測帶（12），第三條是含抗兔抗體或抗鼠抗體的質控帶（13）；測試條置入檢測卡外殼內，樣品墊正對加樣孔，硝酸纖維素膜正對檢測窗孔。

2.權利要求1所述的同時檢測格列苯脲和格列齊特的雙通道檢測卡的檢測方法，其特征在于應用免疫學的方法直接檢測樣品中格列苯脲和格列齊特的含量，檢測樣品為膠囊、片劑或藥丸降糖中藥樣品，處理方法如下：

（1）隨機采集一定量的待測樣本，粉碎均勻；

（2）稱取5g粉碎后的樣品，加入10mL樣品抽提液，充分攪拌混合5min以上，震蕩反應30min；

抽提液配置如下：在70mL甲醇中加入30mL蒸餾水；

（3）將步驟（2）所得溶液移入10mL離心管，4000r/min離心10min，取離心后的上清液；若上清液澄清，則按上清液︰樣品稀釋液為1︰3的比例稀釋，即取上清液100μL加入300μL樣品稀釋液，混合均勻后測定；上清液渾濁，則用濾紙過濾，取過濾后的上清液按上清液100μL加入300μL樣品稀釋液進行稀釋，混合均勻后測定；

樣品稀釋液為pH7.6、10mmoL?PBST溶液；

檢測帶11、12和質控帶13同時顯現棕紅色印跡，表示檢測結果為陰性，說明被檢測樣品中格列苯脲和格列齊特均未超標；

檢測帶11、12不顯示顏色，只有質控帶13顯現棕紅色印跡，檢測結果為陽性，表明被檢測樣品中格列苯脲和格列齊特均超標；

檢測帶11不顯示顏色，檢測帶12和質控帶13同時顯現棕紅色印跡，檢測結果為陽性，表明被檢測樣品中格列苯脲超標，而格列齊特未超標；

檢測帶12不顯示顏色，檢測帶11和質控帶13同時顯現棕紅色印跡，檢測結果為陽性，表明被檢測樣品中格列齊特超標，而格列苯脲未超標；

檢測帶11、12和質控帶13均不顯色，則表明檢測試條失效。