[發(fā)明專利]人乳頭瘤病毒16和18型L1蛋白在酵母中的表達(dá)及應(yīng)用

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010600193.6
• 申請(qǐng)日: 2010-12-22
• 公開（公告）號(hào): CN102181426A
• 公開（公告）日: 2011-09-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王敏文;王玉峰;周長(zhǎng)民;閆昆明;李春明;張千;王飛宇;聶飛;周蕾;郭文軍;高偉星;段廣宇;李衛(wèi)東
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 大連雅立峰生物制藥有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/09
• 分類號(hào): C12N15/09;C12N15/37;C12N15/81;A61K39/295;A61P31/20
• 代理公司: 中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所 11038
• 代理人: 羅菊華

1.制備針對(duì)人乳頭瘤病毒HPV16和HPV18的二價(jià)疫苗的方法，其包括以下步驟：

1)分別優(yōu)化編碼HPV16和HPV18的L1蛋白的基因序列，以獲得經(jīng)優(yōu)化的HPV16和HPV18?L1基因序列，優(yōu)選經(jīng)優(yōu)化的HPV16和HPV18的L1基因序列分別如SEQ?ID?NO.1和2所示；

2)將步驟1)中經(jīng)優(yōu)化的HPV16和HPV18?L1基因序列分別克隆入酵母表達(dá)載體，以獲得重組載體，優(yōu)選所述酵母表達(dá)載體是pYES2；

3)用步驟2)中獲得的重組載體分別轉(zhuǎn)化酵母細(xì)胞，并誘導(dǎo)酵母細(xì)胞表達(dá)HPV16和HPV18的L1蛋白，所述酵母細(xì)胞優(yōu)選是釀酒酵母，更優(yōu)選是釀酒酵母INVSc1或H158；

4)從步驟3)的酵母細(xì)胞分別分離和純化HPV16和HPV18的L1蛋白，并將獲得的HPV16和HPV18?L1蛋白與佐劑混合制備成二價(jià)疫苗，所述佐劑優(yōu)選是氫氧化鋁佐劑或磷酸鋁佐劑。

2.分離的核酸分子，其序列如SEQ?ID?NO.1所示。

3.分離的核酸分子，其序列如SEQ?ID?NO.2所示。

4.含有權(quán)利要求2或3的核酸分子的載體，所述載體優(yōu)選是表達(dá)載體，更優(yōu)選是酵母表達(dá)載體，更優(yōu)選是pYES2。

5.含有權(quán)利要求2或3的核酸分子或權(quán)利要求4的載體的細(xì)胞，所述細(xì)胞優(yōu)選是酵母細(xì)胞，更優(yōu)選是釀酒酵母，更優(yōu)選是釀酒酵母INVSc1或H158。

6.權(quán)利要求2和/或3的核酸分子用于制備二價(jià)疫苗的用途，所述二價(jià)疫苗用于預(yù)防HPV16和HPV18的感染。

7.權(quán)利要求2的核酸分子用于制備HPV16的L1蛋白的用途。

8.權(quán)利要求3的核酸分子用于制備HPV18的L1蛋白的用途。