[發明專利]一種從水稻種子中提取重組人血清白蛋白的方法

有效

• 申請號: 201010597544.2
• 申請日: 2010-12-20
• 公開（公告）號: CN102127164A
• 公開（公告）日: 2011-07-20
• 發明（設計）人: 楊代常;何洋;李光飛
• 申請（專利權）人: 武漢禾元生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/765
• 分類號: C07K14/765
• 代理公司: 北京律誠同業知識產權代理有限公司 11006
• 代理人: 黃韌敏

1.一種從轉基因水稻中提取重組人血清白蛋白的方法，包括步驟：

1)將含有重組人血清白蛋白的轉基因稻谷去殼、稻米粉碎后獲得的轉基因米粉與提取緩沖液混合，攪拌提取，得混合物I；

2)調節步驟1)的混合物I的pH至4.0～4.5，并沉淀1～12小時，得混合物II；

3)過濾步驟2)的混合物II，收集濾液，獲得含有高濃度重組人血清白蛋白的溶液。

2.如權利要求1所述的方法，其中步驟1)中所述轉基因米粉的細度為80～120目；所述提取緩沖液包含10～30mM磷酸鹽緩沖液、10～20mM醋酸鈉、15～30mM硫酸銨和5～20mM辛酸鈉，其pH為6.5～8。

3.如權利要求2所述的方法，其中步驟1)中所述提取緩沖液包含25mM磷酸鹽緩沖液、20mM醋酸鈉、20mM硫酸銨和20mM辛酸鈉，其pH為7.5。

4.如權利要求1所述的方法，其中步驟1)中所述轉基因米粉與提取緩沖液是以重量/體積比(kg/l)1∶5～1∶10混合，提取時間為1～3小時，提取溫度為45～60℃。

5.如權利要求4所述的方法，其中步驟1)中所述轉基因米粉與提取緩沖液是以重量/體積比(kg/l)1∶5混合，提取時間為1～1.5小時，提取溫度為55～60℃。

6.如權利要求1所述的方法，其中步驟2)中所述混合物I的pH調節至4.0～4.5，并在室溫下沉淀3～12小時。

7.如權利要求6所述的方法，其中步驟2)中所述混合物I的pH調節至4.5，并沉淀3小時。

8.如權利要求1所述的方法，其中步驟3)中所述過濾包括用濾布式板框壓濾機壓濾，接著用聚醚砜材質的中空纖維膜微濾。

9.如權利要求7所述的方法，其中所述中空纖維膜為孔徑0.20μm～0.45μm的聚醚砜材質中空纖維膜。

10.如權利要求7所述的方法，其中所述聚醚砜材質中空纖維膜為孔徑0.20μm的聚醚砜材質中空纖維膜。