[發明專利]一種納米流感病毒檢測試紙

無效

• 申請號: 201010595328.4
• 申請日: 2010-12-20
• 公開（公告）號: CN102072956A
• 公開（公告）日: 2011-05-25
• 發明（設計）人: 魏啓明
• 申請（專利權）人: 重慶市科學技術研究院
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558;G01N33/544;G01N33/532
• 代理公司: 重慶市前沿專利事務所 50211
• 代理人: 郭云

1.一種納米流感病毒檢測試紙，包括PVC底板（1），在PVC底板（1）上表面鋪有結合墊（3），在結合墊（3）的左邊設置加樣孔（2），右邊依次粘貼硝酸纖維膜（4）和吸水墊（9），其特征在于：所述硝酸纖維膜（4）上從左到右依次設有線狀或帶狀的三條檢測抗體檢測線和β-肌動蛋白檢測抗體控制線(８)，所述結合墊（3）由玻璃纖維膜組成，在玻璃纖維膜上均勻附著有黑色、藍色和橙色的納米膠體金復合微粒，所述納米膠體金復合微粒的粒徑為20-80nm，其中黑色納米膠體金復合微粒上分別偶聯三種抗目的物檢測抗體，藍色納米膠體金復合微粒上偶聯AMACR抗原,橙色納米膠體金復合微粒上偶聯抗β-肌動蛋白抗體作為內參。

2.根據權利要求1所述的一種納米流感病毒檢測試紙，其特征在于：所述三條檢測抗體檢測線為普通流感病毒檢測抗體檢測線（5）、禽流感病毒檢測抗體檢測線（6）、甲型流感病毒檢測抗體檢測線（7）以及β-肌動蛋白檢測抗體控制線(８)，所述三種抗目的物抗體為普通流感病毒檢測抗體、禽流感病毒檢測抗體和甲型流感病毒檢測抗體。

3.根據權利要求2所述的一種納米流感病毒檢測試紙，其特征在于：所述PVC底板（1）為長為10cｍ、寬為4cｍ的矩形聚乙烯塑料片，所述硝酸纖維膜（4）為長為8cｍ、寬為3cm、厚度為0.1mm、平均孔徑為5um的微多孔硝酸纖維素膜片。

4.根據權利要求2所述的一種納米流感病毒檢測試紙，其特征在于：用磷酸鹽緩沖液分別稀釋３種流感病毒的多克隆抗體，即普通流感病毒多克隆抗體、禽流感病毒多克隆抗體和甲型流感病毒多克隆抗體，使溶液中多克隆抗體重量百分比濃度為0.05-0.3mg/ml，制得普通流感病毒多克隆抗體溶液、禽流感病毒多克隆抗體溶液和甲型流感病毒多克隆抗體溶液；然后用點膜器將上述普通流感病毒多克隆抗體溶液、禽流感病毒多克隆抗體溶液和甲型流感病毒多克隆抗體溶液以3μL/cm分別在硝酸纖維膜（4）上依次點成線狀或帶狀的普通流感病毒檢測抗體檢測線（5）、禽流感病毒檢測抗體檢測線（6）和甲型流感病毒檢測抗體檢測線（7）。

5.根據權利要求2所述的一種納米流感病毒檢測試紙，其特征在于：所述納米膠體金復合微粒上必須含有可供偶聯的免疫配基:羧基,羥基,氨基或醛基，先用無水嗎啉乙磺酸對納米膠體金復合微粒進行預處理,將少量的碳化二亞胺和N－羥基琥鉑酰亞胺加入到微球溶液中,在震蕩器上震蕩活化納米膠體金復合微粒；用黑色納米膠體金復合微粒分別偶聯普通流感病毒檢測抗體、禽流感病毒檢測抗體和甲型流感病毒檢測抗體，藍色納米膠體金復合微粒偶聯AMACR抗原,用橙色納米膠體金復合微粒偶聯抗β-肌動蛋白抗體作為內參；然后將三種免疫納米膠體金復合微粒表面沒有完全反應的活化基團進行封閉，以降低在以后試驗中可能發生的非特異性吸附；再將微球重懸在保護液中,制成濃度為2mg/ml的微球溶液進行保存,保存液的配方為:pH9.0,含0.05%Tween-20,0.1%NaN₃和0.1%BSA的0.005M硼酸鹽緩沖體系；最后將黑,藍和橙三種彩色免疫納米膠體金復合微粒等質量混合制成一種黑藍橙三色混合免疫納米膠體金復合微粒；用移液搶將10-40微升、濃度為為2mg/ml的納米膠體金復合微粒滴在玻璃纖維膜上，然后干燥，得到結合墊（3）。