[發(fā)明專利]一種篩選治療腦損傷藥物的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010594928.9
• 申請(qǐng)日: 2010-12-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102539466A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-07-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張明杰;溫文玉;王文寧
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N24/08
• 分類號(hào): G01N24/08;G01N31/00;A61K31/7048;A61P9/10
• 代理公司: 上海元一成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種篩選腦損傷藥物的方法，具體涉及一種用核磁共振技術(shù)篩選治療腦損傷藥物的方法。本發(fā)明還提供突觸后致密物質(zhì)-95(PSD-95)的PDZ2結(jié)構(gòu)域的核磁共振指紋圖譜。

背景技術(shù)

現(xiàn)有技術(shù)公開(kāi)了N-methyl-D-aspartate受體(NMDAR)是一種離子型的谷氨酸受體，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)展過(guò)程中，對(duì)于神經(jīng)元分化、遷移、突觸的形成、以及軸突的生長(zhǎng)形態(tài)起關(guān)鍵作用。但是，NMDAR的持續(xù)過(guò)激導(dǎo)致的細(xì)胞內(nèi)一氧化氮(NO)的過(guò)量生產(chǎn)將引起缺血缺氧性神經(jīng)損傷，其代表病例為通常稱謂的中風(fēng)。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，在經(jīng)由NMDAR進(jìn)入后突觸神經(jīng)元的鈣流的過(guò)度刺激下，nNOS產(chǎn)生的過(guò)量NO是導(dǎo)致中風(fēng)類神經(jīng)損傷的一個(gè)主要原因。由于NMDAR及nNOS參與多種重要的細(xì)胞生理活動(dòng)，用NMDAR或nNOS的直接抑制劑來(lái)治療NO過(guò)量導(dǎo)致的神經(jīng)損傷通常會(huì)引發(fā)細(xì)胞毒性等副作用，因而近年來(lái)醫(yī)學(xué)研究一直在尋找其替代療法。PSD-95蛋白由于其PDZ2結(jié)構(gòu)域在NMDAR/nNOS通路中起到重要的支架作用[1，2]，而成為一類針對(duì)NO過(guò)量生產(chǎn)引發(fā)的神經(jīng)損傷的極有潛力的藥物靶標(biāo)：可以通過(guò)小分子化合物阻斷NMDAR/PSD-95/nNOS復(fù)合體的形成，進(jìn)而切斷NMDAR與nNOS的物理偶聯(lián)來(lái)抑制中風(fēng)。有關(guān)生化研究表明，阻斷PSD-95PDZ結(jié)構(gòu)域上nNOS的結(jié)合位點(diǎn)在理論上是可行的[3-5]。研究還表明，神經(jīng)細(xì)胞中PSD-95的缺失將減少NO的生成并抑制興奮性中毒，而NMDAR的正常生理活性不受影響[6，7]。Aarts等的體內(nèi)及體外實(shí)驗(yàn)還證實(shí)，小肽可以通過(guò)阻礙NMDAR?NR2B與PSD-95的相互結(jié)合而具有神經(jīng)保護(hù)作用[6]。這些研究結(jié)果表明，破壞PSD-95與NMDAR或nNOS之間的相互作用可能代表一種治療NMDAR介導(dǎo)的神經(jīng)毒性的極具潛力的替代療法。

與本發(fā)明相關(guān)的現(xiàn)有技術(shù)有下述參考文獻(xiàn)：

1.Kornau，H.C.，et?al.，Domain?interaction?between?NMDA?receptor?subunits?and?thepostsynaptic?density?protein?PSD-95.Science，1995.269(5231)：p.1737-40.

2.Brenman，J.E.，et?al.，Interaction?of?nitric?oxide?synthase?with?thepostsynaptic?density?protein?PSD-95?and?alphal-syntrophin?mediated?by?PDZdomains.Cell，1996.84(5)：p.757-67.

3.Tochio，H.，et?al.，Solution?structure?and?backbone?dynamics?of?the?second?PDZdomain?of?postsynaptic?density-95.J?Mol?Biol，2000.295(2)：p.225-37.

4.Tochio，H.，et?al.，F(xiàn)ormation?of?nNOS/PSD-95PDZ?dimer?requires?a?preformedbeta-finger?structure?from?the?nNOS?PDZ?domain.J?Mol?Biol，2000.303(3)：p.359-70.

5.Tochio，H.，et?al.，Solution?structure?of?the?extended?neuronal?nitric?oxidesynthase?PDZ?domain?complexed?with?an?associated?peptide.Nat?Struct?Biol，1999.6(5)：p.417-21.

6.Aarts，M.，et?al.，Treatment?of?ischemic?brain?damage?by?perturbing?NMDAreceptor-PSD-95?protein?interactions.Science，2002.298(5594)：p.846-50.

7.Sattler，R.，et?al.，Specific?coupling?of?NMDA?receptor?activation?to?nitricoxide?neurotoxicity?by?PSD-95?protein.Science，1999.284(5421)：p.1845-8.