[發(fā)明專利]一種建立新疆雪蓮高效液相色譜指紋圖譜的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010594307.0
• 申請日: 2010-12-19
• 公開（公告）號: CN102565257A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 穆青;蘇倩;王新宇;饒峰;胡雪梅;黃靜
• 申請（專利權(quán)）人: 新疆天山蓮藥業(yè)有限公司;復(fù)旦大學(xué)
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;A61K36/285
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司 31200
• 代理人: 吳桂琴

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥學(xué)領(lǐng)域，涉及高效液相色譜指紋圖譜的建立方法，具體涉及一種建立雪蓮高效液相色譜指紋圖譜的方法，尤其是新疆雪蓮高效液相色譜指紋圖譜的建立方法。

背景技術(shù)

雪蓮是一種重要的中藥和民族藥材，具有溫腎助陽，祛風(fēng)去濕，活血通經(jīng)。中醫(yī)和民間用于腎虛，寒濕瘀阻所致的風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及痛經(jīng)等病癥。市場上已有雪蓮口服液作為中藥制品用于治療多種慢性病，如新疆天山蓮藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的“雪蓮口服液”是2002年國家批準(zhǔn)的準(zhǔn)字號中成藥(國藥準(zhǔn)字Z20025166)，后上升為國家標(biāo)準(zhǔn)藥品(WS-10155(ZD-0155)-2002)，其擁有良好的國內(nèi)市場。

但是，目前雪蓮藥材主要是按照國家標(biāo)準(zhǔn)采用蘆丁作為標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比色測定進(jìn)行質(zhì)量檢測和分析。由于中藥材GAP標(biāo)準(zhǔn)尚不能完全實行到位，資源稀缺；市場上藥材品質(zhì)不規(guī)范，僅僅用蘆丁和綠原酸不能較準(zhǔn)確反映雪蓮中有效活性成分；同時，蘆丁是多種植物藥材中的普遍成分，尤其不能準(zhǔn)確反映雪蓮這種特殊藥材的特征性成分。有研究同時使用的薄層色譜定性分析也不能準(zhǔn)確反映作為藥品的雪蓮口服液中不同物質(zhì)成分和組分之間比例。

隨著藥物檢測技術(shù)的發(fā)展和高效液相色譜(HPLC)在中藥分析中應(yīng)用日益廣泛，高效液相色譜方法檢測雪蓮化學(xué)成分的研究和技術(shù)相繼出現(xiàn)，相關(guān)研究對不同產(chǎn)地的雪蓮藥材或雪蓮藥材進(jìn)行了液相色譜分析，以鑒定其中共有峰為目標(biāo)進(jìn)行研究[1,2]。近年相關(guān)研究（包括中國發(fā)明專利申請）開始關(guān)注雪蓮液相色譜圖中色譜峰進(jìn)行指認(rèn)和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的對照，這些研究的報道，對雪蓮的藥材分析和檢測的方法有了較大改善[3-8]。但是，其中使用的標(biāo)準(zhǔn)對照物質(zhì)均為黃酮類成分和綠原酸，液相指紋圖譜的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中缺乏雪蓮藥材中的特征性成分倍半萜內(nèi)酯，使得現(xiàn)有液相指紋圖譜仍然不能全面反映雪蓮藥材和雪蓮口服液藥品的化學(xué)物質(zhì)特征。造成上述問題的原因主要在于雪蓮藥材中倍半萜單體化合物分離鑒定的困難和液相檢測條件的困難。

與本發(fā)明相關(guān)的現(xiàn)有技術(shù)有：

[1]?苗愛東,?孫殿甲,?彭燕等.?HPLC法建立新疆雪蓮指紋圖譜研究.中成藥2003,?25?(9):?691-693.

[2]?黃毅,?周茜,?閻明?等,?天山雪蓮不同部位總黃酮含量及高效液相指紋圖譜分析.?中藥材2005,?28?(11):?980?-?982.

[3]?苗愛東,孫殿甲,彭燕等.雪蓮注射液HPLC指紋圖譜的研究.中國中藥雜志?2004,?29?(11):?1044?-?1046.?

[4]?薛秀峰,?張海茹,?潘麗娜?等.?雪蓮及其注射液的指紋圖譜研究.哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報?2005,?39?(1):?72-74.

[5]?王曉玲,?蔡敏,?周燕?等.?新疆雪蓮的高效液相指紋圖譜及及液-質(zhì)聯(lián)用分析.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)?2006,?18?(4):?624?-?627.

[6]?閻明,黃毅,仲婕?等,HPLC/DAD光譜相似指數(shù)法在雪蓮指紋圖譜中的研究.?藥物分析雜志2007,27(4):506-509.

[7]?歐元,?袁曉凡,?徐春明?等.?天山雪蓮HPLC指紋圖譜的研究.中草藥?2008,?39?(1):?105?-?108.?

[8]?中國發(fā)明專利,?袁曉凡,?趙兵等.?新疆雪蓮的HPLC指紋圖譜和DNA指紋圖譜的建立方法.發(fā)明專利申請公布說明書，CN101418348A(2009)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種建立雪蓮高效液相色譜指紋圖譜的方法，尤其是建立新疆雪蓮高效液相色譜指紋圖譜的方法。

本發(fā)明對雪蓮藥材尤其是新疆雪蓮藥材中特征成分倍半萜類化合物用色譜技術(shù)進(jìn)行分離，通過波譜方法確定它們的成分，并以其作為標(biāo)識物質(zhì)對新疆雪蓮的藥材的提取物建立了液相色譜指紋圖譜的方法。

具體而言，本發(fā)明的建立雪蓮高效液相色譜指紋圖譜的方法，其特征在于，其包括步驟：

步驟一?確定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分離方法

所述的分離方法為正相硅膠色譜法(300-400目，硅膠H)，反相硅膠色譜法(RP-18)，凝膠色譜法或溶解度分離法。

步驟二?確定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)鑒定方法

其中，

核磁共振方法：