[發明專利]一種新的犬新孢子蟲速殖子的體外培養和染色方法

無效

• 申請號: 201010593980.2
• 申請日: 2010-12-17
• 公開（公告）號: CN102533556A
• 公開（公告）日: 2012-07-04
• 發明（設計）人: 李建華;呂強;張西臣;宮鵬濤;張楠;楊舉;李赫;張國才
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: C12N1/10
• 分類號: C12N1/10;C12Q1/02
• 代理公司: 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 22100
• 代理人: 王薇

1.犬新孢子蟲速殖子的培養方法，其特征在于培養的具體步驟為：首先常規培養MCF-7乳腺癌細胞，當其長成細胞單層后，按10⁴/ml?接種1ml犬新孢子蟲；之后用含2%胎牛血清的RPIM-1640培養基進行培養，每天利用倒置顯微鏡觀察胞外新孢子蟲速殖子的數目，可看到胞外新孢子蟲速殖子的數目從第2天開始緩慢增長，自第3天開始迅速增長，在第4天即可達到頂峰，在第五天顯著下降。

2.犬新孢子蟲速殖子的染色采用胞內速殖子吖啶橙染色，其特征在于染色的具體步驟為：新孢子蟲速殖子經多聚甲醛固定，吖啶橙染色后經普通熒光顯微鏡照相觀察；MCF-7細胞感染新孢子蟲速殖子后，在第三天和第五天分別進行吖啶橙染色；經熒光顯微鏡觀察，在第三天細胞內可直觀、清晰地看到大量的速殖子，在第五天可看到細胞和速殖子均顯著減少。