[發明專利]一種細菌的檢測方法

無效

• 申請號: 201010593081.2
• 申請日: 2010-12-16
• 公開（公告）號: CN102108375A
• 公開（公告）日: 2011-06-29
• 發明（設計）人: 王振新;高晶清;劉殿駿
• 申請（專利權）人: 中國科學院長春應用化學研究所
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 魏曉波;逯長明

1.一種細菌的檢測方法，包括以下步驟：

步驟1：提供對照細菌樣品；

步驟2：固定有一種以上凝集素的固體支持物分別與待測樣品和對照細菌樣品充分作用，洗滌除去固體支持物上未結合的樣品；

步驟3：洗滌后的固體支持物與凝集素修飾的金納米粒子充分作用，洗滌除去固體支持物上未結合的金納米粒子；

步驟4：檢測固體支持物上結合的金納米粒子的共振光散射信號，與對照細菌樣品共振光散射信號比較，分析待測樣品細菌種類。

2.根據權利要求1所述方法，其特征在于，所述凝集素為蓖麻凝集素I、山槐黃柏苷凝集素、荊豆凝集素、大豆凝集素、雞冠珊瑚樹凝集素、接骨木凝集素、西非單葉豆凝集素、麥胚凝集素、刀豆素A、橙黃網胞盤菌凝集素、喇叭水仙凝集素、蔓陀蘿凝集素、扁豆凝集素或花生凝集素。

3.根據權利要求1所述方法，其特征在于，所述金納米粒子半徑為10nm～13nm。

4.根據權利要求1所述方法，其特征在于，所述檢測共振光散射信號之前還包括增強信號步驟。

5.根據權利要求4所述方法，其特征在于，所述增強信號步驟具體為與銀增強溶液反應5～10min，18.2MΩ水洗滌。

6.一種用于細菌檢測的凝集素修飾的金納米粒子，其特征在于，金納米粒子直接或間接與凝集素結合。

7.一種凝集素修飾的金納米粒子的制備方法，包括：

步驟1：金納米粒子與多肽反應，得到多肽修飾的金納米粒子，所述多肽為Cys-Ala-Leu-Asn-Asn和摩爾比為9∶1的混合物；

步驟2：多肽修飾的金納米粒子與親和素反應，得到親和素修飾的金納米粒子；

步驟3：生物素與凝集素反應，得到生物素修飾的凝集素；

步驟4：親和素修飾的金納米粒子與生物素修飾的凝集素反應，得到凝集素修飾的金納米粒子。

8.權利要求7所述制備方法制備的凝集素修飾的金納米粒子。

9.一種用于細菌檢測的試劑盒，包括權利要求6或8所述凝集素修飾的金納米粒子和凝集素生物芯片，所述凝集素通過將一種以上的凝集素固定在固體支持物上得到。