[發明專利]一種抗凝血鼠藥大隆分子印跡聚合物及其作為固相萃取劑的應用

無效

• 申請號: 201010591374.7
• 申請日: 2010-12-16
• 公開（公告）號: CN102070753A
• 公開（公告）日: 2011-05-25
• 發明（設計）人: 常靖;何瑞瓊;朱軍;張蕾萍;孟子暉;欒玉靜;郝紅霞;于忠山;何毅
• 申請（專利權）人: 公安部物證鑒定中心
• 主分類號: C08F265/10
• 分類號: C08F265/10;C08F2/48;C08J9/26;B01J20/285;B01J20/28;B01J20/30;B01D15/22
• 代理公司: 北京理工大學專利中心 11120
• 代理人: 張利萍

技術領域

本發明涉及一種抗凝血鼠藥大隆分子印跡聚合物及其作為固相萃取劑的應用，屬于分析化學與材料科學技術領域。

背景技術

近年來，大隆、溴敵隆等抗凝血鼠藥引發的投毒、自殺、誤服等刑事案件屢見不鮮，生物樣本中大隆、溴敵隆的分析檢驗至關重要。但由于司法鑒定領域毒物分析檢材復雜多樣、雜質干擾嚴重等，在腐敗生物樣本(如體液、毛發或臟器組織)中的高效分離、提取仍然是目前法醫毒物分析工作者們研究的熱點和難點。

近年來開發的分子印跡術，為法醫毒物分析毒物的提取、分離提供了新思路和新途徑。分子印跡聚合物(MIPs)具有預定性、識別性、實用性三大特點，對目標分子的空間結構具有“記憶”效應，能夠高選擇性識別復雜樣品中的印跡分子，這些特點使得MIPs能夠成為非常有吸引力的特異性吸附材料，已在分離領域有廣泛的應用研究。分子印跡固相萃取(MISPE)技術是將分子印跡聚合物作為固相萃取劑，集分子印跡技術與固相萃取技術于一體，為樣品的采集、富集和分析提供了極大的方便，克服了生物或環境樣品體系復雜、預處理手續繁雜等不利因素，適用于腐敗生物樣本中目標物的提取分離、凈化。

有關大隆分子印跡聚合物的制備及其在樣本前處理中的應有還未見相關文獻報道。

發明內容

本發明的目的是為了解決已有技術中復雜樣本中大隆等抗凝血鼠藥提取分離困難的問題，提出一種抗凝血鼠藥大隆分子印跡聚合物及其作為固相萃取劑的應用。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的。

本發明的一種抗凝血鼠藥大隆分子印跡聚合物，該分子印跡聚合物的制備方法為：

1)采用大隆作為模版分子，同功能單體在溶劑中混勻，混勻后在4℃以下保存24h形成預聚體；然后在常溫下加入交聯劑和引發劑，在4℃以下、用波長為260nm的紫外光引發聚合24h，得到球形顆粒聚合物；

功能單體為丙烯酰胺，溶劑為二甲基亞砜；交聯劑為三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯TRIM，引發劑為偶氮二異丁腈；功能單體、模板分子和溶劑的摩爾比為4∶1∶20；交聯劑的體積用量為溶劑的1.6％，引發劑的摩爾用量為模版分子的4％；

2)用有機溶劑甲醇/甲酸浸泡步驟1)得到的球形顆粒聚合物并攪拌2h，球形顆粒聚合物中的模板分子溶解在有機溶劑甲醇/甲酸中，然后離心分離去除有機溶劑甲醇和乙酸；甲醇與甲酸的體積比為9∶1；

3)重復步驟2)2次以上；

4)經步驟3)清洗后的球形顆粒聚合物中加入乙醇，洗滌除去甲酸；

5)重復步驟4)2次以上；

6)經步驟5)清洗后的球形顆粒聚合物中加入丙酮，以除去細小顆粒，然后真空干燥，得到大隆分子印跡聚合物。

本發明的一種抗凝血鼠藥大隆分子印跡聚合物作為固相萃取劑的應用，具體步驟為：

1)大隆分子印跡固相萃取柱的制備：

將制備的大隆分子印跡聚合物溶于甲醇中制成懸浮液，攪拌均勻后緩慢注入帶有20μm篩板的聚乙烯空固相萃取柱中，真空抽吸使大隆分子印跡聚合物在空固相萃取柱中分布均勻，然后在大隆分子印跡聚合物上方裝入20μm篩板，大隆分子印跡聚合物與甲醇的比50mg∶5mL；

2)制備樣品：

取血液1mL，用2mL甲醇沉淀混旋，用6mL去離子水稀釋，離心，取清液；

3)大隆分子印跡固相萃取方法：

依次用1mL甲醇、1mL甲醇/水混合溶劑活化大隆分子印跡固相萃取柱，然后將步驟2)制備的樣品上固相萃取柱，然后再用2mL甲醇/水混合溶劑洗滌，最后用2mL甲醇/甲酸混合溶劑洗脫，收集洗脫液，在空氣流下揮干，然后用200μL的甲醇溶解殘渣，最后用LC、LC-MS分析；

甲醇/水的體積比為3∶7，甲醇/甲酸的體積比為9∶1。

有益效果

本發明的制備方法簡便、快速，對結構相似物大隆、溴敵隆有很好的吸附性能，具有高度專一性和吸附選擇性，為復雜基質中抗凝血鼠藥大隆、溴敵隆的快速篩查、提取分離提供新手段，具有廣闊的應用前景，有望實現工業化生產并投入實際應用；建立的分子印跡固相萃取方法，操作簡單，對目標物選擇性的吸附，對復雜基質中目標物的提取分離起到凈化作用，有效去除基體雜質，提高了分離精度，降低了檢測限，適用于法庭科學領域腐敗生物樣本中抗凝血鼠藥大隆、溴敵隆的提取分離。

具體實施方式

以下的實施案例在于詳細說明本發明，而非限制本發明。

實施例

一種抗凝血鼠藥大隆分子印跡聚合物，該分子印跡聚合物的制備方法為：